【摘 要】
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目前,HPV预防疫苗的研究策略主要是利用适当载体在原核或真核细胞中表达HPV外壳蛋白,用该表达产物诱导体液免疫.为了得到经过正确的翻译后加工从而具有天然构象的HPV 16外壳
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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目前,HPV预防疫苗的研究策略主要是利用适当载体在原核或真核细胞中表达HPV外壳蛋白,用该表达产物诱导体液免疫.为了得到经过正确的翻译后加工从而具有天然构象的HPV 16外壳蛋白,研究人员选用杆状病毒表达载体在昆虫细胞sf9中表达HPV 16主要外壳蛋白L1和交要外壳蛋白L2,它们在昆虫细胞中可组装成病毒样颗粒(Virus-Like Particle,VLP).病毒样颗粒是近年来疫苗研究的主要方向之一.HPV 16外壳蛋白L1、L2的真核表达是国家九五课题的一项重要内容.该研究利用GIBCO BRL公司的B<,AC>-T<,O>-B<,ACTM>系统,(1)构建了 重组供体质粒pF<,AST>B<,AC> HTb-Ll、pF<,AST>B<,AC> HTb-L2;(2)得到了两株重组杆状病毒;(3)用重组杆状病毒分别感染昆虫细胞sf9,SDS-PAGE、Western-Blot检测表明分别表达了相应的6×His融合蛋白.并对适当的裂解方法、适宜感染复数、最佳收获时间等作了一些研究;(4)用两株重组杆状病毒共感染sf9,SDS-PAGE、Western-Blot检测表明两种融合蛋白同时得到了表达.该研究为进一步大量表达并纯化HPV 16病毒样颗粒抗原疫苗,进行动物试验及临床试验打下了基础.
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