【摘 要】
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水稻转基因技术是推动水稻分子生物学研究和精准育种的重要工具。农杆菌介导法是水稻遗传转化的主流方法。然而受基因型限制,典型籼稻的转化效率仍然偏低。本研究以顽拗型籼稻品种9311和华占为受体材料,研究了不同大量元素、微量元素、有机物和碳源的组合,植物激素浓度,侵染培养基,乙酰丁香酮（AS）浓度和光周期对遗传转化效率的影响。本研究主要结果如下:（1）在组织培养试验中,MS大量元素、B5微量元素、N6有机
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水稻转基因技术是推动水稻分子生物学研究和精准育种的重要工具。农杆菌介导法是水稻遗传转化的主流方法。然而受基因型限制,典型籼稻的转化效率仍然偏低。本研究以顽拗型籼稻品种9311和华占为受体材料,研究了不同大量元素、微量元素、有机物和碳源的组合,植物激素浓度,侵染培养基,乙酰丁香酮（AS）浓度和光周期对遗传转化效率的影响。本研究主要结果如下:（1）在组织培养试验中,MS大量元素、B5微量元素、N6有机物和麦芽糖为9311最优组合,华占最优组合为MS大量元素、MS微量元素、MS有机物和麦芽糖。（2）诱导培养基中添加0.5 mg/L的BAP或1.5 mg/L的KT可显著提高9311和华占的组织培养再生率,最高可达70.0%以上。（3）在9311和华占的侵染过程中,添加100μM AS的转化效率高于200μM AS。（4）光周期实验显示9311和华占宜采用不同的光周期策略,9311在全黑暗条件下进行愈伤诱导和筛选,在全光照条件下进行分化,转化效率最高,达6.0%-6.4%,而华占在12小时光照/12小时黑暗条件下进行诱导、筛选和分化,获得的转化效率最高（5.0%-7.5%）。（5）使用A侵染培养基和B侵染培养基分别侵染华占愈伤组织,它们的平均抗性愈伤组织率相近,分别为83.0%和78.1%;平均转化频率分别为9.7%和7.6%统计学分析结果表明,A侵染培养基和B侵染培养基对华占的转化频率无显著差异。本文优化了顽拗型籼稻9311和华占的组织培养和遗传转化体系,该体系也可以应用于其它相关籼稻基因型的遗传转化。
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