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目的:观察人趋化素样因子1(human chemokine-like factor1,hCKLF1)对人动脉血管平滑肌细胞(arterial smooth muscle cells,ASMCs)的趋化和增殖作用。
方法:收集用hCKLF1真核细胞表达载体瞬时转染293T细胞72小时后的上清培养液,采用细胞迁移实验检测hCKLF1对人ASMCs的趋化作用。分别用转染上清刺激人ASMCs24,48,72小时,用微量细胞培养噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测其对人ASMCs是否具有促增殖作用。
结果:1、0倍和10倍稀释的上清培养液实验组迁移细胞数与对照组迁移细胞数相比,差异有统计学意义(0倍稀释P<0.05,10倍稀释P<0.01)。100倍和1000倍稀释的上清培养液实验组迁移细胞数和对照组的迁移细胞数相比,差异无统计学意义(P>0.05)。平滑肌细胞分别被不同浓度百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)处理,PTX浓度为0μg/l和2μg/l时,10倍稀释的上清培养液实验组迁移细胞数与对照组迁移细胞数相比,差异有统计学意义(P<0.01)。PTX浓度为10μg/l,10倍稀释的上清培养液实验组迁移细胞数与对照组迁移细胞数相比,差异无统计学意义(P>0.05)。2、MTT结果显示吸光度值:实验组24小时OD490=0.339±0.015与对照组OD490=0.335±0.018相比,差异无统计学意义(P>0.05)。48小时实验组OD490=0.393±0.092与对照组OD490=0.376±0.080相比,差异有统计学意义(P<0.05),72小时实验组OD490=0.480±0.023,与对照组OD490=0.424±0.011相比,差异有统计学意义(P<0.05).
结论:1.hCKLF1对人ASMCs具有明显趋化作用,且该趋化作用可被百日咳毒素所阻断。2.hCKLF1对人ASMCs具有促增殖作用。