目的 检测大鼠膝关节实验性骨关节炎关节软骨中的p53，caspase-3和bcl-2蛋白和mRNA在不同时期的表达，明确这三种重要的凋亡相关因子在骨关节炎中的作用。 方法 大鼠膝关节实验性骨关节炎的动物模型采用经典的Hulth法。按体重苯巴比妥腹腔注射麻醉，手术显微镜下，依次切断右侧膝关节的内侧副韧带，切除内侧半月板，切断前后交叉韧带。左侧膝关节未做处理作为对照。随机分为三组，每组12只，分别饲养4周，8周，12周后，取内侧胫骨平台的关节软骨标本。形态学的改变通过观察软骨的大体外观和进行H-E染色。应用免疫组化方法检测p53，caspase-3和bcl-2蛋白的表达，并记数各自的阳性细胞率。应用RT-PCR技术检测p53，caspase-3和bcl-2mRNA的表达，并应用计算机软件检测每条电泳带的平均灰度，与内参β-actin平均灰度的比值为mRNA的相对值。采用CS2000统计学软件进行数据的统计分析。 结果 三组对照侧大鼠膝关节的关节软骨都为淡蓝白色，表面光滑而有光泽。而在OA模型侧，W4组，可见关节软骨表面失去光泽；W8组，无光泽，为淡白色，软骨表面粗糙；W12组，软骨表面凸凹不平，出现裂隙，为淡黄白色，胫骨平台内侧更出现了骨赘样物(3／12)。H-E染色见三组对照侧的关节软骨的细胞致密而均匀。而在OA模型侧，W4组见细胞均匀稍差，有软骨细胞肿胀;WS组可见软骨细胞稀疏，排列不均，可见细胞集聚，软骨细胞肿胀，空泡细胞增多;W12组可见软骨细胞稀疏更明显，细胞集聚成簇，空白区增多，较多空泡细胞且空泡变大，软骨表面凸凹不平。免疫组化见三组的对照侧和OA模型侧的关节软骨均可见户3，caspase一3和bcl一2蛋白的表达。巧3主要为核着色，casPase一3主要胞浆着色，bcl一2在核周和浆内都有着色，PBS替代一抗的空白对照无DAB显色。在W4，WS，W12组，OA模型侧关节软骨p53，casPase一3和bcl一2阳性细胞率与对照侧相比，有统计学差异(P<0.05)。说明在OA模型侧的关节软骨中p53，caspase一3蛋白表达明显增高，而bcl一2蛋白表达降低。RT一PCR表明三组的对照侧和OA模型侧的关节软骨的卢3，casPase一3和bcl一ZmRNA与蛋白表达相一致。而且，组间比较:p53，easpase一3和bel一2的mRNA表达在三组对照侧无统计学差异(P>0.05);户3和casPase一3的mRNA表达在OA模型侧W4，WS，W12组之间相比较，有统计学差异(P<0.05)，然而，bcl一2在三组之间无统计学差异(P>0.05)。说明在OA模型侧的关节软骨中p53，ca印ase一3 mRNA的表达明显增高，并随时间增加而表达持续上调。而OA模型侧bcl一2 mRNA的表达降低，但并未随时间而变化。结论 本研究表明在OA早期，关节软骨的p53、casPase一3、bcl一2蛋白和mRNA表达就开始发生明显改变。而且在OA关节软骨中p53、caspase一3mRNA表达的上调与OA进程密切相关，而bcl一2 mRNA表达的下调随OA进程无明显差异。说明OA关节软骨中凋亡和抗凋亡的平衡被破坏，凋亡因素占支配地位，可能是OA的发病机制之一。