蓝莓皮花色苷的提取分离及稳定性研究

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蓝莓是杜鹃花科越橘属植物,在我国资源丰富。研究表明,蓝莓果的花色苷类物质主要存在于果皮中,并且花色苷类物质具有消除眼睛疲劳,保护视力,以及抗氧化、抗衰老、抗溃疡、抗炎和抗癌等生理功能。本文选用蓝莓冻果的果皮作为原料,对其花色苷进行较为系统的研究,为更好的开发和利用蓝莓资源提供理论支持。本文系统研究花色苷的提取工艺,大孔树脂纯化方法,薄层层析及高效液相色谱对花色苷的分离效果比较,HPLC-MS对花色苷成分进行分析及花色苷的稳定性。主要研究结论如下:1、蓝莓皮花色苷提取工艺的最佳条件为:体积分数为40%的酸性乙醇(pH2.0),提取时间60min,料液比10mg:10mL,提取温度50℃,花色苷的含量为7.5660mg/g果皮。2、AB-8大孔树脂的静态吸附解吸条件为:吸附平衡时间为4h;解吸平衡时间为1h;当花色苷溶液的pH值为2.0时,大孔树脂对其吸附能力比较强;用体积分数为40%的酸化乙醇(pH2.0)洗脱。AB-8大孔树脂的动态吸附解吸最佳条件为:将220mL的花色苷溶液按照1.0mL/min的流速上样,用150mL体积分数为40%的酸性乙醇(pH2.0)按照1.0mL/min的流速进行洗脱。经AB-8大孔树脂纯化后的蓝莓皮花色苷的色价为52.10。以硅胶板作为层析介质,通过用不同的展开剂分离蓝莓皮花色苷,其中以水-乙醇-正丁醇-乙酸乙酯(11:9:25:35)和正丁醇-乙酸-水(4:1:5)作为展开剂分离效果较好。通过HPLC-MS分析得到蓝莓皮花色苷含有12种花色苷单体。3、蓝莓皮花色苷在60℃及以下热稳定性较好,且对光较敏感;该花色苷在pH≤5.0的条件下较稳定;其耐氧化还原性较差;葡萄糖对该花色苷有增色效应;山梨酸钾对该花色苷有增色效应,并增加其稳定性;Na+具有增色效应,且高浓度的Na+能增加花色苷的稳定性;Mg2+、Zn2+、Ca2+具有增色效应,但对花色苷的稳定性影响不显著;Al3+具有增色作用,且低浓度的Al3+对花色苷的稳定性影响不显著;K+不能使花色苷的吸光度值增加,且对花色苷的稳定性影响不显著;Cu2+、Fe3+不能使花色苷的吸光度值增加,且对花色苷有破坏作用。
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