肿瘤相关抗原（TAA）诱导机体免疫系统产生的自身抗体是稳定存在于正常人血浆中的蛋白质。目前的研究表明，卵巢癌患者血浆中一些自身抗体水平显著高于正常人，这提示了自身抗体有可能成为诊断卵巢癌的血清学标志物。本研究拟通过原核表达系统获得肿瘤相关抗原重组蛋白，用其检测卵巢癌患者和正常人血浆中抗TAAs抗体的水平，并评价单独检测和联合检测抗TAAs抗体在卵巢癌免疫诊断中的价值。　　方法:　　1鉴定重组质粒：将重组质粒pET28a–Koc，pET28a–C-myc，pET28a–HCC1，分别转化到大肠杆菌DH5α细胞中，通过测序的方法鉴定重组质粒构建的正确性。　　将鉴定后的重组质粒分别转化到表达宿主大肠杆菌BL21中，构建对应的原核表达系统，大量诱导表达目的蛋白。　　2蛋白纯化：通过镍离子亲和层析的方法纯化带有组氨酸标签的重组蛋白，并测定纯化蛋白的浓度。　　3应用流行病学和卫生统计学的方法设计病例对照研究，确定研究对象，并计算样本量。　　4收集血浆标本，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测卵巢癌和正常人血浆中的自身抗体，比较其在卵巢癌和正常人血浆中水平。　　5以正常人血浆中自身抗体含量的平均值加两个标准差作为截断值，计算卵巢癌和正常对照组自身抗体阳性率，然后用筛检试验真实性和可靠性评价方法评价自身抗体检测卵巢癌的诊断价值。　　6联合检测12种肿瘤相关抗原（CyclinE，RalA，p62，p53，CyclinB1，Koc， HCC1，p90，p16，C-myc，AHSG，14-3-3zeta）对卵巢癌的诊断价值进行评价，筛选出诊断卵巢癌的“最佳组合”。　　7应用人卵巢癌标志物CA125ELISA Kit检测卵巢癌患者和正常对照血浆的CA125含量，评价“最佳组合”并联CA125对卵巢癌的诊断价值。　　8应用SPSS21.0进行统计分析数据，检验水准取为0.05，未加说明均为双侧检验。　　结果:　　1成功构建了原核表达系统 BL21(pET28a-Koc， pET28a-C-myc， pET28a-HCC1)；采用镍离子亲和层析方法纯化得到Koc，C-myc，HCC1重组蛋白，浓度分别为0.67mg/ml，0.70mg/ml，0.40mg/ml。　　2酶联免疫吸附试验结果显示，卵巢癌患者血清中C-myc、Koc、RalA自身抗体的含量高于正常对照,检验统计量t值分别为5.3，3.26，3.18，P值均小于0.05，差异均有统计学意义。卵巢癌患者血清中p53, C-myc, p90, p62, AHSG,14-3-3zeta, RalA, p16自身抗体阳性率高于对照组，差异有统计学意义。　　3联合9种TAAs可使检测的灵敏度达61.36％，特异度85.0%，约登指数0.46，阳性似然比4.1，阴性似然比为0.45，一致率73.8%，Kappa值0.469。结果表明联合检测提高了卵巢癌的诊断价值。　　4结合临床上应用的指标CA125，并联检测的评价结果为，灵敏度94.7%，特异度79.20%，约登指数0.9，阳性似然比23.2，一致率86.1%，具有较高的临床诊断价值。　　结论:　　1成功获得纯化重组蛋白Koc,HCC1,C-myc；C-myc,p53, p90, p62, AHSG,14-3-3zeta,RalA, p16抗体在卵巢癌患者血清中阳性率偏高，可能是卵巢癌的潜在的血清标志物；　　2使用单个TAA检测卵巢癌的诊断价值较低，并联9种TAAs（p53, C-myc, p90, p62, AHSG,14-3-3zeta, RalA,Koc,p16）检测可提高对卵巢癌的诊断价值；9种TAAs组合辅助血浆CA125检测，具有较高的诊断卵巢癌的价值。