【摘 要】
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目的研究丙泊酚对胃癌患者术后外周血NK细胞肿瘤杀伤活性的影响,并初步探讨分子机制,以此探究其临床应用价值。方法选取本院治疗的36例经临床和病理明确诊断为胃癌的患者。采用丙泊酚进行麻醉诱导和维持,分别于麻醉诱导前1 h(T1),手术结束后24 h(T2)收集患者外周血各5 ml,术后采集新鲜切除的肿瘤组织及相应癌旁组织,通过磁珠分选纯化自然杀伤细胞(Natural killer,NK)与胃癌细胞BG
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目的研究丙泊酚对胃癌患者术后外周血NK细胞肿瘤杀伤活性的影响,并初步探讨分子机制,以此探究其临床应用价值。方法选取本院治疗的36例经临床和病理明确诊断为胃癌的患者。采用丙泊酚进行麻醉诱导和维持,分别于麻醉诱导前1 h(T1),手术结束后24 h(T2)收集患者外周血各5 ml,术后采集新鲜切除的肿瘤组织及相应癌旁组织,通过磁珠分选纯化自然杀伤细胞(Natural killer,NK)与胃癌细胞BGC-823共培养,观察T1、T2外周血NK细胞对人胃癌细胞的凋亡率;通过流式细胞术分析颗粒酶B(Granzyme B,GZMB),γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ),穿孔素(Perforin,PFP)的表达。将正常健康志愿者提供的外周血分离纯化得来的NK细胞与BGC-823培养上清共培养,观察NK细胞的肿瘤杀伤能力及GZMB的表达变化;再加入丙泊酚,观察丙泊酚对NK细胞的肿瘤杀伤功能及GZMB表达能力的影响;再在此基础上加入转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1),观察丙泊酚对NK细胞的肿瘤杀伤能力及GZMB的回复作用;免疫印迹检测SMAD4蛋白在NK细胞中的表达,干扰SMAD4的表达,观察NK细胞杀伤活性及GZMB的表达及丙泊酚的回复作用。结果1.患者T2时间点外周血NK细胞肿瘤杀伤活性高于T1(P<0.05)。2.其NK细胞中效应分子GZMB表达升高(P<0.05)。3.胃癌细胞BGC-823培养上清能够抑制NK细胞肿瘤杀伤活性及下调GZMB表达(P<0.05)。4.分别加入丙泊酚和TGF-β1抗体后,胃癌细胞BGC-823培养上清对NK细胞的肿瘤杀伤能力及GZMB表达都有明显回复;机制上,丙泊酚和TGF-β1抗体分别加入后,共培养后的NK细胞中SMAD4蛋白核转位明显高于BGC-823共培养组;干扰NK细胞中SMAD4的表达后,丙泊酚对NK细胞GZMB表达的促进作用受到明显抑制。结论胃癌患者外周血NK细胞肿瘤杀伤活性与健康人相比明显降低,而丙泊酚诱导麻醉能够促进胃癌患者外周血NK细胞的肿瘤杀伤活性。丙泊酚通过SMAD4信号通路调控NK细胞中GZMB表达,从而影响其功能。
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