在我国,肝癌的发生率和死亡率仍居于前五位,严重影响患者生存时间和生活质量。手术切除和肝移植仍是治疗早期肝癌最有效的治疗手段,但对于中晚期肝癌,目前缺乏行之有效的治疗手段。调节机体免疫是治疗中晚期肝癌的一种辅助方法,在一定程度上能够改善患者生活质量和延长患者生存时间。Treg、Th17、Thl、Th2细胞介导的免疫调节,在肿瘤免疫中具有重要地位。在肿瘤患者体内,Treg/Th17、Th1/Th2失衡普遍存在,恢复其平衡状态,是治疗肿瘤的另一重要思路。我们前期的研究证实,重组胸腺素a原对癌性腹水小鼠生存时间有较好的改善作用,并且联用IL-2时具有较好的抑瘤效果,但其对肝癌荷瘤小鼠Treg、Th17、Thl、Th2细胞的影响尚未清楚。本实验试图通过早期及进展期用药干预,观察重组ProTα对肝癌荷瘤小鼠抑瘤率的影响,并明确其对Treg、Th17、Thl、Th2细胞是否具有调节作用。将36只昆明小鼠随机分成空白组、荷瘤组、药物干预组,H22小鼠肝癌细胞皮下移植建立荷瘤小鼠模型,腹腔注射重组ProTα,观察7天、14天后药物干预对肝癌荷瘤小鼠抑瘤率的影响,并通过流式细胞术观察Treg细胞比例,Realtime PCR技术检测Treg、Th17、Thl、Th2细胞特异性因子(Foxp3、RORγt、T-bet、GATA3)的转录水平,进一步探讨其重组ProTα治疗肿瘤的相关机制。实验结果显示,移植瘤7d后,重组ProTα干预组和荷瘤组瘤重对比无显著差异。重组ProTα干预14d后,药物干预组瘤重较荷瘤组明显减轻,差异具有统计学意义。流式细胞术检测外周单个核细胞中CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+细胞比例后发现,荷瘤14d后,荷瘤组较空白组Treg细胞比例升高,差异具有统计学意义。不论是重组ProTα干预14d组还是进展期药物干预组,Treg细胞比例均明显降低。实时荧光定量PCR结果显示,荷瘤小鼠中T-bet mRNA表达低于正常小鼠,而GATA3高于正常小鼠,呈Th2细胞优势状态,而腹腔注射重组ProTα后小鼠T-bet表达逐渐增加,而GATA3则逐渐下降,重组ProTα能够增加Thl细胞的表达,恢复Th1/Th2平衡,从而抑制肿瘤生长。另一方面我们还发现,荷瘤小鼠中RORyt及Foxp3 mRNA水平均呈现高表达状态,腹腔注射重组ProTα干预后,二者表达均有所降低。在肝癌小鼠中,Treg及Th17细胞可能共同参与促进荷瘤小鼠肝癌细胞的生长,重组ProTα的抗肿瘤作用可能与降低Th17和Treg细胞表达有关。本实验通过荷瘤后第1天和第8天分别开始腹腔注射重组ProTα,模拟早期用药和进展期用药干预,实验结果表明重组ProTα能够抑制肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长,并且早期、长期用药效果更好,其作用机制涉及下调Treg及Th17细胞数量、恢复Thl/Th2平衡,从而抑制肝癌细胞免疫逃逸,提高机体的抗肿瘤效应,并且为下一步临床应用提供理论依据。