质体编码的聚合酶(PEP)是叶绿体中主要的聚合酶,负责绝大部分叶绿体基因的转录。PEP是由叶绿体编码的核心亚基以及细胞核编码的外周蛋白组成。pTAC15/mTERF8是PEP复合物(也称TAC复合物)成员之一。本文研究了pTAC15在质体基因表达过程中的作用。pTAC15含有8个保守的线粒体转录终止因子(mTERF)结构域,属于线粒体转录终止因子(mTERF)家族的成员。烟草体内瞬时表达结果表明,pTAC15:GFP融合蛋白定位于叶绿体中。进一步利用pTAC15:MYC转基因植株进行免疫实验分析表明,pTAC15是一个类囊体定位的叶绿体蛋白。结合BN-PAGE,2-D电泳和免疫杂交的实验,pTAC15:MYC出现在660kD的超分子复合物中,同PEP复合物核心亚基rpoB共迁移。酵母双杂交实验表明,pTAC15在PEP复合物中与另一个成员pTAC10相互作用。为了分析pTAC15在叶绿体基因表达过程中的作用,分离鉴定到ptac15的突变体。qRT-PCR分析表明,突变体中绝大部分叶绿体基因的表达水平与野生型相比没有明显差异,只有psbJ的转录水平上出现了上调。环式PCR的实验结果表明,野生型中叶绿体psbJ的转录终止位于终止密码子后第94和95的核苷酸位置,而ptac15突变体中psbJ的转录终止除了位于终止密码子后第94和95的核苷酸位置外,还出现了其他异常的转录终止位点。这些结果表明,pTAC15的缺失干扰了叶绿体基因组中psbJ的转录终止。凝胶阻滞(EMSA)实验以及体内的免疫共沉淀产物qPCR分析表明,pTAC15能够特异性结合质体基因psbJ的3’端序列。进一步的体外生化实验结果表明,pTAC15蛋白具有转录终止的作用。这些研究结果表明,拟南芥叶绿体蛋白pTAC15作为PEP复合物中的一员,能够特异性结合叶绿体基因psbJ的3’末端,参与该基因转录终止的作用。