聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒载BDNF基因的制备及其对大鼠颅脑损伤治疗作用的研究

来源 :西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fulinbo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:制备聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒后携带脑神经营养因子(Brai n-derived neurotrophic factor BDNF)基因形成复合物,观察复合物对颅脑有损伤的大鼠的治疗作用。方法:本次实验使用乳化聚合法制作聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(PB CA-NPs),用透射电子显微镜分析纳米粒的形态以及粒径。构建真核表达载体PEGFP-BDNF,用Hind III,Sal I酶双酶切以后进行鉴定及测序,然后用PB CA-NPs进行包裹制成PBCA-PEGFP-BDNF。按照随机数字表法将48只雄性SD大鼠分为空白组、PBCA组、PEGFP-BDNF组和PBCA-PEGFP-BDNF组,每组12只。采用自由落体致伤原理制备颅脑损伤大鼠模型后分别注入生理盐水、PBCA纳米粒、质粒PEGFP-BDNF、PBCA-PEGFP-BDNF1 m L。7天后取大鼠右侧大脑创伤周围脑组织100mg,采用RT-PCR检测大鼠脑组织中BDNF m RNA的表达;使用荧光显微镜、Western blotting及免疫组化检测BDNF蛋白在大鼠脑组织中的表达情况;采用Morris水迷宫试验检测PBCA-PEGFP-BDNF对于颅脑损伤大鼠的治疗作用。结果:实验所制得的PBCA-NPs粒径均匀、电动电位较高,DNA负载率为(62.23士2.15)%。采用PBCA-NPs包裹PEGFP-BDNF并转染大鼠后可见BDNF在模型大鼠脑组织内表达增高。RT-PCR的结果显示,4组大鼠BDNF m RNA的表达量差异有统计学意义(F值为112.668,P值为0.000),与前三组相比较,PBCA-PEGFP-BDNF组的BDNF m RNA表达量明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示,4组大鼠BDNF蛋白表达差异有统计学意义(F值为66.629,P值为0.000),PEGFP-BDNF组中BDNF蛋白的表达高于前两组,而PBCA-PEGFP-BDNF组中BDNF的表达明显高于前3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PBCA-NPs是一种良好的基因载体,可提高所携带基因进入组织后的表达率及治疗作用。
其他文献
2012年5月,成都市在14个经济发达镇进行新一轮的行政管理体制改革试点工作。我们选择离主城区比较远、地缘不占明显优势的金堂县淮口镇进行了调研,冀以个案来看经济发达镇行
[目的]探讨640层DVCT全脑灌注联合颈部血管成像在急性腔隙性脑梗死患者非腔隙性发病机制研究中的应用价值。[方法]2013年9月-2016年2月在昆明医科大学第四附属医院192例临床
从了解茶多酚的成分和性质入手,介绍了茶多酚不同工业分离提纯工艺的原理和特点,主要针对溶剂萃取法、离子沉淀法和树脂吸附法三种工艺进行了对比研究.建议开发模拟流动床技
随着信息技术的迅速发展,互联网作为一种全新的传播媒介正在深刻地影响着人类生活的方方面面。网络已经成为师生获取知识和信息的重要渠道,并进而影响到大学生的世界观、人生
目的:探讨高血压病的非药物疗法的方法和疗效。方法:回顾分析2012年9月-2013年9月期间习练传统养生气功易筋经48例患者对所患原发性高血压病的影响,将纳入病例的所有患者在我
对火电汽轮机本体高背压供热改造的方式进行了分类介绍,并对汽轮机改造后的运行提出一些建议,为机组进行高背压改造提供借鉴。
从整地施肥、品种选择和育苗、移栽定植、田间管理、收获等方面总结西瓜下茬复栽大葱的栽培技术,以充分利用光热资源,提高复栽指数。
伴随着经济社会的不断快速发展,企业的宣传工作对于企业经营的服务水平高低直接影响企业的可持续发展。本文基于对提升企业宣传工作水平的重点和关键的探讨,提出了一系列提升
<正> 在幼儿一日活动中教师用于组织教育的语言表达方式,大致可分以下四种:第一种是指令性语言——要求幼儿"去干什么"。第二种是限制性语言——要求幼儿"不去干什么"。第三
<正> 英语教师都有过这样的体会:学生们都是兴致勃勃地开始学习英语的,然而随着学习内容的增加,知识难度的加大,许多学生兴趣锐减,甚至产生一种厌烦情绪,从而直接影响了学习