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1目的(1)探讨ATF6-CHOP通路对STZ-DM大鼠内质网应激的影响,及其与针刺抑制T2DM大鼠胰腺细胞凋亡间的关系;(2)观察针刺治疗对T2DM患者的临床疗效。2方法(1)实验研究:选取SPF级的雄性SD大鼠80只,按血糖分层随机分为造模组70只和空白对照组10只,然后分别以高脂高糖饲料和普通饲料喂养4周。造模组加入低剂量STZ腹腔注射制备STZ-DM大鼠模型,选取30只造模成功大鼠(RBG≥16.7mmol/L)随机分为针刺治疗组(简称针刺组)、模型对照组(简称模型组)以及二甲双胍治疗组(简称西药组),每组10只。治疗期间空白组和模型组不做治疗,仅做固定处理;针刺组取胰俞、后三里(足三里)、内庭穴针刺,其中后三里穴和内庭穴通电针(连续波,频率:10Hz,强度:1m A);西药组:选择100mg·kg-1盐酸二甲双胍灌胃;连续治疗6天后休息1天,共治疗4周。干预期间所有大鼠均通过普通饲料喂养。实验结束后取血和胰腺组织,通过葡萄糖氧化酶法测定FPG,通过实时荧光RT-PCR技术和Western blot技术测定各组STZ-DM大鼠胰腺组织的ATF-6、CHOP、Bcl-2、Bax基因表达和蛋白含量。(2)临床研究:将符合纳入、排除标准的10例T2DM患者,取合谷、曲池、中脘、足三里、三阴交、太溪、然谷、内庭、胰俞、脾俞、肾俞针刺,留针30分钟,10分钟行针一次,隔天治疗一次,每周三次,共治疗8周。治疗结束后,检测患者的FPG、FINS,计算ISI、评估Homa-IR、Homa-β。3结果(1)实验研究:(1)随机血糖:治疗前,模型组、针刺组和西药组的RBG显著高于空白组(P<0.01);干预4个疗程后,模型组和空白组较干预前RBG均有所升高,但均无统计学意义(P>0.05);针刺组的RBG与治疗前相比明显降低(P<0.05),与模型组相比呈降低趋势,但无统计学意义(可能与血糖水平离散度高或样本例数不足有关),但仍高于空白组(P<0.01),针刺组与西药组之间无统计学差异(P>0.05)。表明:针刺能降低STZ-DM大鼠的RBG。(2)胰腺内质网应激指标:4个疗程后,模型组大鼠胰腺组织CHOP基因表达明显高于空白组(P<0.01),针刺组、西药组与模型组相比均明显降低(P<0.01);模型组的CHOP蛋白含量明显高于空白组(P<0.05);针刺组、西药组较模型组相比有降低趋势;模型组ATF-6基因表达明显高于空白组(P<0.01),针刺组和西药组与模型组相比均明显降低(P<0.01),但均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组AFT-6蛋白含量明显高于空白组(P<0.01);针刺组较模型组相比有降低趋势(P<0.01),西药组较模型组相比有降低趋势(P<0.05)。结果表明:STZ-DM大鼠的胰腺组织存在内质网应激,而针刺可通过干预ATF6-CHOP信号通路来改善大鼠胰腺组织的内质网应激。(3)胰腺细胞凋亡指标:4个疗程后,模型组Bax基因表达显著高于空白组(P<0.01),针刺组、西药组与模型组相比较均明显降低(P<0.01),但均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.01);模型组Bax蛋白含量明显高于空白组(P<0.01);针刺组、西药组与模型组相比明显降低(P<0.05);模型组Bcl-2基因表达显著低于空白组(P<0.01),针刺组、西药组显著高于模型组(P<0.01),但低于空白组(P<0.01)。模型组Bcl-2蛋白含量明显低于空白组(P<0.01);针刺组、西药组与模型组相比明显升高(P<0.01)。结果表明:针刺可以抑制STZ-DM大鼠的胰腺细胞凋亡。(2)临床观察:经针刺治疗后T2DM患者的FPG、FINS、Homa-IR较治疗前均明显下降(P<0.01),ISI、Homa-β升高(P<0.01),差异有统计学意义。结果表明针刺可以改善T2DM患者的胰岛素抵抗,增强机体对胰岛素的敏感性。4结论(1)ATF6-CHOP信号通路可能是诱导内质网应激的途径之一;(2)针刺可以通过调节STZ-DM大鼠的ATF6-CHOP信号通路来改善其胰腺组织内质网应激,抑制胰腺组织的细胞凋亡;(3)针刺可以缓解T2DM患者的临床症状,改善胰岛素抵抗,增强机体对胰岛素的敏感性。