【摘 要】
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目的：通过观察c-myc对胆囊癌细胞运动和侵袭能力的影响,以论证c-myc在肿瘤侵袭和转移中的作用,为胆囊癌侵袭和转移干预提供分子靶点。方法：采用实时定量PCR和western blot检测
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目的：通过观察c-myc对胆囊癌细胞运动和侵袭能力的影响,以论证c-myc在肿瘤侵袭和转移中的作用,为胆囊癌侵袭和转移干预提供分子靶点。方法：采用实时定量PCR和western blot检测亲代和高转移胆囊癌细胞系中c-myc基因表达,设计靶向c-myc的小RNA[small interference RNA,siRNA]转染高转移的胆囊癌细胞,通过体外侵袭实验研究c-myc siRNA对胆囊癌高转移细胞迁移和侵袭能力的影响。此外,通过western blot方法检测转染c-myc siRNA后c-myc下游部分信号通路的变化,进一步研究c-myc siRNA抑制胆囊癌细胞转移的机制。结果：通过实时定量PCR检测发现,c-myc的RNA水平在GBC-SD/M3细胞中是其在GBC-SD细胞中的2.18倍(p=0.0019)；在蛋白水平上,c-myc在GBC-SD/M3中的表达也高于其在GBC-SD中的表达。靶向c-myc的siRNA转染GBC-SD/M3细胞后,与对照相比,c-myc siRNA能够有效地抑制c-myc蛋白在GBC-SD/M3细胞中的表达。与对照相比,c-myc siRNA可以有效的抑制GBC-SD/M3细胞的迁移(p=0.0168)。对GBC-SD/M3细胞的侵袭能力检测后发现,c-myc siRNA同样也能够有效的抑制GBC-SD/M3细胞的侵袭(p=0.0005)。进一步检测c-myc siRNA对LIN28蛋白水平的影响,表明c-myc siRNA转染后,LIN28的蛋白水平也相应下调,let-7a的表达水平有所上升,从而抑制肿瘤细胞的转移。结论：c-myc在高转移的胆囊癌细胞中表达上调。通过siRNA下调其表达后可以抑制胆囊癌细胞的转移和侵袭,这种抑制作用可能与LIN28的下调有关。
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