VEGF反义RNA对骨髓瘤细胞U266生长及血管生成作用研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:fang0998_cn
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目的:探讨以VEGF为靶点,利用反义RNA技术治疗MM的可行性。方法:构建携带反义VEGF基因的真核表达载体(AS-VEGF);采用脂质体法转染重组质粒及空质粒到骨髓瘤细胞U266,G418筛选出稳定转染AS-VEGF的骨髓瘤细胞U266-AS及转染空载体的骨髓瘤细胞U266-V;采用RT-PCR和Western blotting技术检测U266-AS、U266-V细胞中VEGF的表达;采用四唑蓝快速比色法(MTT法)观察U266-AS、U266-V细胞在无血清培养基中的增殖变化;采用流式细胞术检测U266-AS、U266-V细胞在无血清培养基中的凋亡变化;采用MTT法、Transwell小室迁移实验观察由U266-AS、U266-V细胞培养制备的条件培养基(CM)对内皮细胞增殖、迁移的影响。结果:成功构建携带反义VEGF基因的真核表达载体AS-VEGF;分别获得稳定转染AS-VEGF的骨髓瘤细胞U266-AS及转染空载体的骨髓瘤细胞U266-V;证实U266-AS细胞VEGF基因的表达明显低于U266-V细胞;VEGF反义RNA能抑制U266细胞增殖、促进无血清时细胞的凋亡;此外,该反义RNA还抑制内皮细胞的增殖、迁移。结论:VEGF反义RNA可以抑制骨髓瘤细胞增殖,促进其凋亡,并具有抗血管生成作用。因此,VEGF反义RNA治疗可能成为MM治疗的一个新的治疗策略。
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