苜蓿辐射突变体诱导和愈伤组织高效再生的研究

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本文以新疆大叶苜蓿、新牧1号杂花苜蓿和新疆野生黄花苜蓿无菌苗下胚轴为外植体,研究了七种诱导培养基对愈伤组织诱导和生长的影响;增殖培养基中附加谷胱甘肽和脱落酸对愈伤组织增殖、分化及再生的影响; 60Co-γ射线处理三种苜蓿种子诱导愈伤突变体的影响,建立了三品种的高效再生系统,得到以下结论: (1) 建立了三种苜蓿高效再生体系,结果如下:①诱导培养基,MS+2,4-D2mg/L+NAA 2mg/L+KT1mg/L(黑暗条件);②增殖培养基,新疆大叶苜蓿、新牧1 号:MS+2,4-D2mg/L +NAA2mg/L+KT1mg/L+GSH15mg/L+ABA3mg/L(光照条件),新疆野生黄花苜蓿:MS+2,4-D 2mg/L+NAA2mg/L+KT1mg/L+GSH15mg/L+ABA6mg/L(光照条件);③分化培养基,MS0(无激素),其中琼脂为0.8%,蔗糖为3%(光照条件);④生根培养基,1/2MS,其中琼脂0.7%,其中蔗糖2%(光照条件)。(2) 增殖培养和分化培养过程中, 光照培养条件较黑暗培养条件更易于愈伤组织分化,且可不同程度地缩短植株再生周期。(3) 实验共筛选出17 个具有高再生能力的基因型,其中新疆大叶苜蓿6 个,新牧1 号杂花苜蓿5 个,新疆野生黄花苜蓿6 个,其试管苗均在土壤中移栽成功,并生长良好。(4) 外植体离体培养条件下,新疆大叶苜蓿辐射半致死剂量、致死剂量分别为200KR、500KR;新牧1号杂花苜蓿辐射半致死剂量、致死剂量为150KR、500KR;新疆野生黄花苜蓿辐射半致死剂量、致死剂量为150KR、350KR。(5) 外植体离体培养条件下,三种苜蓿愈伤组织对60CO-γ射线辐射的敏感性大小为新疆野生黄花苜蓿>新牧1 号杂花苜蓿>新疆大叶苜蓿。(6) 确定了60CO-γ射线辐射的干种子在大田能够成活一半和全部死亡的剂量分别为:新疆大叶苜蓿为100KR、350KR;新牧1号杂花苜蓿和新疆野生黄花苜蓿的半致死剂量在50~100KR之间,致死剂量是350KR。
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