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目的本研究旨在从细胞水平研究柚皮苷(Naringin)对D-半乳糖诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)衰老的保护机制，探讨P16，P21，P53，tgfb1mRNA衰老相关基因在柚皮苷抗衰老中的重要作用，为今后柚皮苷作为延缓衰老治疗提供理论和实验依据。方法（1）通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠BMSCs，通过形态学观察，绘制其生长曲线，分别向成骨、成脂方向诱导分化。（2）建立衰老模型：取4﹑8﹑16﹑32﹑64g∕L浓度的D-半乳糖分别作用于第3代BMSCs，用MTT法检测细胞存活率，β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老染色率。结合MTT实验及β-半乳糖苷酶染色法，确定以16g∕L的D-半乳糖处理第3代BMSCs，培养至第6代，即为D-半乳糖诱导的大鼠MSCs衰老模型。（3）将BMSCs为对照组、16g∕L D-半乳糖诱导的BMSCs为衰老组，衰老组分别加入10﹣7、10﹣6、10﹣5、10﹣4、10﹣3、10﹣2mmol／L浓度柚皮苷作为保护组。分别用MTT法检测各干预组细胞增殖活力，β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老程度,总SOD检测试剂盒检测各组总SOD活性。用RT-PCR法检测各组细胞中衰老相关基因P16，P21，P53，tgfb1mRNA的表达水平。结果（1）大鼠BMSCs生长以梭形细胞为主，细胞生长良好，传代后可连续稳定传代10代以上。测其生长曲线显示大鼠BMSCs符合正常细胞生长特征且生长较旺盛。对其分别进行成脂、成骨诱导后，油红O染色、碱性磷酸酶染色和茜素红染色均呈阳性。（2）4﹑8﹑16﹑32﹑64g∕L的D-半乳糖处理年轻BMSCs后，与对照组相比较各组细胞存活率呈现不同程度下降(P<0.05)。β-半乳糖苷酶染色法下4﹑8﹑16﹑32﹑64g∕L浓度的D-半乳糖处理后细胞染色率均高于对照组(P<0.05)。（3）衰老组分别加入10﹣7、10﹣6、10﹣5、10﹣4、10﹣3、10﹣2mmol／L浓度的柚皮苷保护后，柚皮苷保护组细胞存活率均高于衰老组(P<0.05)。各浓度柚皮苷保护组β-半乳糖苷酶染色比衰老组均有所降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。各浓度柚皮苷保护组总SOD活性高于衰老组(P<0.05)。10﹣7、10﹣6、10﹣5、10﹣4mmol／L浓度的柚皮苷能明显下调p16的表达(P<0.05)，10﹣7、10﹣6、10﹣5、10﹣4、10﹣3mmol／L浓度的柚皮苷能明显下调p21的表达(P<0.05)，各浓度的柚皮苷均能明显下调P53、tgf‐β1的表达(P<0.05)。结论柚皮苷可以减缓BMSCs衰老进程，其机制可能与抑制P16，P21，P53，tgf‐β1mRNA的表达有关。