抗真菌药物对巨噬细胞吞噬光滑假丝酵母菌的影响

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[目的]研究抗真菌药物对巨噬细胞吞噬光滑假丝酵母菌状态下,光滑假丝酵母菌SOD酶活性和巨噬细胞分泌细胞因子变化。[方法]1.收集来自不同疾病的光滑假丝酵母菌菌株并通过分子生物学鉴定,加上一株标准株作为研究菌株。2.用RAW264.1巨噬细胞与实验菌株分共同培养。3.用SOD活性测定试剂盒测定光滑假丝酵母菌被巨噬细胞吞噬不同时间点超氧化物歧化酶活性,观察不同时间点SOD值的变化。4.用ELISA试剂盒测定巨噬细胞细胞因子的分泌情况。5.用改良美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)推荐的M27-A方案进行菌株的药敏实验。6.用低于每株菌MIC 一个浓度的的抗真菌药物预处理巨噬细胞,再与相应实验菌株共同培养后测定光滑假丝酵母菌SOD酶活性及巨噬细胞IL-6、IL-8、TNF-α。7.使用SPSS软件分析抗真菌药物处理和不处理巨噬细胞状态下巨噬细胞吞噬光滑假丝酵母菌后菌株超氧化物歧化酶及巨噬细胞细胞因子分泌的影响。[结果]1.光滑假丝酵母菌被巨噬细胞吞噬后,其SOD活性值随时间延长逐渐增高,后下降。2.与未使用抗真菌药物相比,伊曲康唑、两性霉素B能促使光滑假丝酵母菌在巨噬细胞中的SOD活性的升高(统计学分析结果分别为F=6.026,p<0.05;F=5.768,p<0.05);与未用药物处理相比,米卡芬净则抑制菌株SOD活性(F=9.216,p<0.05)。3.巨噬细胞吞噬光滑假丝酵母菌后IL-6、IL-8、TNF-α的分泌均较未吞噬光滑假丝酵母菌时明显升高。4.未吞噬菌株时米卡芬净组与未用药组巨噬细胞TNF-α分泌有统计学差异(t=6.541,P<0.05)。5.吞噬菌株后米卡芬净组巨噬细胞TNF-α分泌水平下降,其余细胞因子无统计学差异,伊曲康唑组和两性霉素B组三种细胞因子分泌与未用药组相比无统计学差异。[结论]1.光滑假丝酵母菌被巨噬细胞吞噬后实验菌株SOD酶活性随时间增加升高,6h时达到高峰,以后缓慢下降。2.伊曲康唑、两性霉素B预处理巨噬细胞可促进光滑假丝酵母菌被巨噬细胞吞噬后菌株SOD活性的升高,而米卡芬净药物对菌株SOD酶活性则有抑制作用。3.巨噬细胞吞噬光滑假丝酵母菌后分泌IL-6、IL-8、TNF-α随时间升高。4.米卡芬净具有下调未吞噬光滑假丝酵母菌状态下巨噬细胞TNF-α分泌水平,对IL-6和IL-8的分泌无影响;伊曲康唑和两性霉素B对三种细胞因子的分泌均无影响。5.米卡芬净降低吞噬光滑假丝酵母菌后巨噬细胞分泌IL-6、IL-8、TNF-α值,伊曲康唑和两性霉素B则对吞噬光滑假丝酵母菌后巨噬细胞分泌IL-6、IL-8、TNF-α无影响。
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