温肾固疏方调控载脂蛋白E对去势大鼠的脂代谢以及骨代谢影响的作用机制研究

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目的:观察温肾固疏方对去卵巢骨质疏松模型大鼠脂代谢及骨代谢指标的影响,初步研究载脂蛋白E影响骨代谢与脂代谢的机制。采用ELISA法测定血清载脂蛋白E、血清骨钙素、TC、TG、LDL水平等脂代谢指标。证实温肾固疏方能够通过调节脂代谢影响骨代谢指标,并载脂蛋白E在其中起到至关重要的作用,对预防及治疗绝经后脂代谢紊乱以及骨质疏松提供新思路。前期实验研究已经证明,该组去势大鼠通过服用温肾固疏方以补肾固本的治疗原则可以减少骨量流失,从而降低骨质疏松症的发病几率。该实验为前期实验的后续研究,通过研究该方剂对载脂蛋白E的调节作用,证实该方剂对脂代谢有影响,从而可将调节脂代谢作为治疗骨质疏松的新靶点。方法:将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、雌激素组、温肾固疏方高、中、低剂量组,假手术组仅切除卵巢周围脂肪组织,不切除卵巢,其余大鼠切除双侧卵巢,建立绝经后骨质疏松模型,造模1月后,中药汤剂灌胃干预8周,末次给药结束后放血处死。双能X射线法测定去势大鼠离体股骨、腰椎BMD、BMC,电子式双柱万能材料试验机测定股骨弾性模型、最大承载力、刚性、最大应力,全自动生物仪测HDL-C、LDL-C、TG、TC,计算动脉粥样硬化指数(AI),采用酶联免疫吸附测定(Elisa)法测量大鼠血清 OT/BGP、Lipid、ApoE、sRANKL、OPG、BMPs。结果:(1)与假手术组对比,模型组BMD、BMC下降(P<0.05)。股骨弾性模型、最大承载力、刚性、最大应力皆下降(P<0.05)。OPG、BMPs下降(P<0.05),Lip上升(P<0.05),ApoE上升(P<0.01),LDL-C上升(P<0.05)。(2)与模型组对比,雌激素、低、高剂量组大鼠股骨BMD、BMC上升(P<0.05)。雌激素组、中剂量组弾性模型增高(P<0.05);雌激素组、高剂量组最大承载力增高(P<0.05);低、高剂量组刚性增高(P<0.05);雌激素组、低、高剂量组最大应力增高(P<0.05)。雌激素组、低、高剂量组血清OT/BGP上升(P<0.05);低、高剂量组sRANKL下降(P<0.05);雌激素组、低剂量组血清OPG上升(P<0.05);雌激素组、低、高剂量组BMPs上升(P<0.05)。高、中、低剂量组血清Lip下降(P<0.05),低剂量组ApoE下降(P<0.05);低、高剂量组LDL-C下降;低剂量组TG下降(P<0.05)。低、高剂量组动脉粥样硬化指数下降(P<0.05)。结论:(1)去势大鼠骨质量与骨强度较空白对照组水平明显下降,加上前期实验对骨小梁切片的研究,绝经后雌激素紊乱会导致骨代谢水平改变,更容易造成骨破坏以及骨流失。(2)雌激素替代疗法有效治疗骨破坏以及骨流失;温肾固疏方使去势大鼠的骨质量与骨强度提高,BMD、BMC、弾性模型、最大承载力、刚性、最大应力皆上升,温肾固疏方可以治疗绝经后骨质疏松,有效治疗去势大鼠的骨质疏松症状,缓解骨破坏和骨流失。(3)模型组Lipids、ApoE、HDL-C、LDL-C、TC、TG水平均显著上升,去势后出现脂代谢紊乱,AI升高,出现脂代谢性心血管疾病的风险高于空白对照组;模型组OT/BGP、sRANKL、OPG、BMPs的变化,较空白对照组说明去势大鼠出现骨形成减少,骨量流失严重。(4)使用温肾固疏方灌胃的治疗组,与模型组相比较,高、中、低剂量组骨代谢水平皆有提升,高、中、低剂量组脂代谢相关指标明显下降,温肾固疏方对绝经后骨质疏松症有治疗效果,也能改善绝经后出现的脂代谢异常情况。温肾固疏方可能通过调控ApoE影响去势大鼠脂代谢,从而改善骨代谢,对绝经后骨质疏松症有治疗效果。
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