在肝细胞癌中TLRs的表达与能量代谢相关性分析

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目的:  初步探讨Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)与肝癌细胞糖代谢的关系,以及对肝细胞癌预后的影响。  方法:  通过免疫组化、western-blot与real-time RT-PCR方法检测93例肝癌组织中和17例正常肝组织中TLR4在mRNA和蛋白水平的表达情况,分析其表达与临床病理参数之间的关系,以及预后分析;通过脂多糖(Lipopolysacoharides,LPS)诱导HepG2肝癌细胞,检测肝癌组织中TLR4、葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter4,GLUT4)的表达情况以及HepG2细胞外葡萄糖浓度的变化,同时检测糖酵解过程中关键酶丙酮酸激酶2(type M2 pyruvate kinase,PKM2)活性的改变和细胞内ATP浓度的变化。应用SPSS13.0统计软件进行数据处理。  结果:  在93例肝癌组织中TLR4高表达61例,低表达32例,TLR4蛋白在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05); TLR4蛋白的表达与肝癌的分化程度呈正相关(r=0.263,P<0.05); Kaplan-Meier法生存分析显示TLR4蛋白的表达与术后无复发生存时间明显相关(Log rank:P<0.05);多因素Cox比例风险模型分析,结果TLR4蛋白的表达与预后明显相关(P<0.05)。LPS诱导HepG2细胞,通过western-blot与real-time RT-PCR方法检测,与对照组相比,TLR4和Glut4表达增加,细胞外葡萄糖浓度降低,同时M2型丙酮酸激酶活性和细胞内ATP浓度增加;阻断TLR4的表达,与对照组比较,Glut4表达、细胞外葡萄糖浓度以及丙酮酸激酶2活性和细胞内ATP浓度未见明显变化。  结论:  在肝癌组织中TLR4表达升高,而且TLR4的过表达与肝癌预后不良明显相关;LPS可能通过TLR4调节肝癌的糖酵解过程。TLR4可以作为判定肝细胞癌预后的新的指标和肝癌治疗的新的靶点。
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