骨骼肌的生长发育是动物个体发育的重要环节，目前的研究表明肌肉生长抑制素(myostatin，MSTN)对骨骼肌的生长发育起着极其重要的抑制作用，任何可以干扰MSTN基因表达或表达产物活性的措施，都可能影响肌肉的正常发育。利用原核表达系统表达真核基因，进而研究该基因的结构与功能是分子生物学技术也是基因工程的重要内容。本实验主要研究内容如下： MSTN基因的RT-PCR扩增、PMD18-TSimpleVector克隆及测序：根据Genebank中鸡MSTN基因序列，采用Oligo6.22及PrimerPremier5.0软件设计一对寡核苷酸引物，进行RT-PCR扩增，扩增产物经凝胶回收后被克隆到PMD18-TSimpleVector克隆载体中，经测序证明获得了两个大小不等的阳性重组质粒并分别命名为T-14和T-20，其中T-20重组质粒插入片段长度为1128bp，该序列与GeneBank上的gi：38349516序列同源性可达99％；T-14重组质粒插入片段长度为985bp，与T-20相比缺失143bp碱基，缺失部位在374-517bp之间，其它部分与T-20相比在51bp、234bp、324bp等处有三处碱基不同。到目前为止国内、外均未见到鸡体内同时存在MSTN基因不同转录子的报道，这一发现具有重大的研究意义。 MSTN基因的表达：从T-14和T-20重组质粒上切下目的基因片段，然后与表达载体PGEX-KG连接，分别构建表达重组质粒PGEX-KG-14和PGEX-KG-20，经PCR和双酶切鉴定其正确性，以备转化表达工程菌用。将上述鉴定为阳性的表达重组质粒PGEX-KG-14和PGEX-KG-20分别转化到BL21(DE3)表达工程菌感受态细胞中，振荡培养后加入IPTG进行诱导表达，诱导表达结果经SDS-PAGE鉴定表明，在诱导后3h和5h，PGEX-KG-20均获得了清晰的外源目的基因蛋白带，而PGEX-KG-14却未见清晰的表达。 外源重组融合蛋白的成功表达为下一步制备目的蛋白的抗体做好了充分的准备，为进一步研究MSTN和MSTN基因的结构、功能以及该基因的遗传学本质等奠定了坚实的基础。