探讨安脑平冲方通过NRF2/HO-1通路对大鼠脑出血后氧化应激的影响

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目的:通过研究安脑平冲方对大鼠脑出血后NRF2、HO-1蛋白的表达以及对脑组织形态学的影响,从而探究其对大鼠脑出血后神经保护的作用机制。方法:将SD雄性大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、安脑平冲方组(C组)、尼莫地平组(D组),各组各设1d、3d时间点,每个时间点各6只大鼠,如有大鼠死亡,则继续造模补充。假手术组、模型组给予蒸馏水1ml/100g灌胃;安脑平冲方组予以配制好的药液1ml/100g灌胃;尼莫地平组将溶解的药液(1ml溶液中含尼莫地平片20mg)1ml/100g灌胃。然后在相应的时间点完成各组大鼠神经功能缺损评分,断头取脑组织,进行HE染色,检测NRF2、HO-1蛋白表达的情况。结果:1.大鼠神经功能缺损评分:在1d、3d两个时间点中,模型组的评分均显著高于假手术组,差异具有明显统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,安脑平冲方组、尼莫地平组在1d时间点评分均有所下降(P<0.05),差异具有统计学意义;安脑平冲方组和尼莫地平组的评分在3d时间点明显降低(P<0.01),差异具有明显统计学意义,说明安脑平冲方和尼莫地平能有效的改善大鼠脑出血后神经功能缺损评分。尼莫地平组的评分变化趋势与安脑平冲方组大致相同,P>0.05,差异无统计学意义,说明安脑平冲方与尼莫地平两者之间的治疗效果无明显优劣。2.HE染色:假手术组中,大鼠脑组织的神经元饱满,神经细胞排列整齐,细胞核淡染,核仁清晰,神经元胞浆丰富。模型组中,大鼠脑组织排列疏松、紊乱,部分神经细胞明显水肿、甚至坏死,坏死神经细胞主要表现为细胞核固缩、空泡样变化。与模型组相比,安脑平冲方组、尼莫地平组中大鼠脑组织神经细胞坏死的数目减少,细胞水肿较前减轻,神经细胞形态较前恢复;随着用药时间的增加,神经细胞改善更加明显。3.Western Blot检测:(1)在1d时间点中,与假手术组相比,HO-1蛋白在模型组、安脑平冲方组、尼莫地平组中表达均有所增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。相对模型组而言,HO-1蛋白在安脑平冲方组、尼莫地平组中表达明显上调,差异具有统计学意义(P<0.01)。HO-1蛋白在尼莫地平组的表达相对于安脑平冲方组而言无明显差异,P>0.05,差异无统计学意义。NRF2蛋白表达和HO-1蛋白表达趋势大致相同。NRF2蛋白在模型组、安脑平冲方组、尼莫地平组的表达相对于假手术组而言有所升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。安脑平冲方组、尼莫地平组中NRF2蛋白的表达与模型组相比明显上调,差异具有统计学意义(P<0.01)。NRF2蛋白表达在安脑平冲方组和尼莫地平组中无明显差异,P>0.05,差异无统计学意义。(2)在3d时间点中,与假手术组相比,HO-1蛋白和NRF2蛋白在模型组、安脑平冲方组、尼莫地平组中表达明显上升,差异具有统计学意义(P<0.01)。HO-1蛋白和NRF2蛋白在安脑平冲方组、尼莫地平组中的表达相对模型组而言显著增加,差异具有明显统计学意义(P<0.01)。与安脑平冲方组相比,尼莫地平组中的HO-1蛋白、NRF2蛋白表达无明显上升趋势,P>0.05,差异无统计学意义。结论:1.安脑平冲方能有效的降低大鼠脑出血后神经功能缺损评分,且随着用药时间的延长,对大鼠神经功能缺损症状改善越明显。2.安脑平冲方可以改善大鼠脑出血后血肿周围组织的神经细胞形态,减少神经细胞坏死的数目以及减轻细胞水肿。3.安脑平冲方可以通过上调NRF2、HO-1蛋白的表达,以抑制脑出血后氧化应激反应,起到脑组织神经细胞保护的作用。
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