人肠道病毒D68型(Enterovirus D68,EV-D68)为小RNA病毒科,肠道病毒属病毒,1962年于美国加利福尼亚州儿童鼻咽拭子中发现。肠道病毒D68感染人群通常为幼儿,尤其是有哮喘病史的人群更容易引发严重的呼吸道感染、肺炎、支气管炎等疾病,感染后期可能出现心肺疾病等并发症,严重者可导致死亡。目前尚未研制出对其有效的疫苗和治疗方法。本研究主要围绕肠道病毒D68感染细胞诱导的新型免疫应答机制,即应激颗粒SGs的形成机制,以及新型小分子药物法匹拉韦T705对EV-D68的抗病毒作用展开。我们发现,EV-D68感染细胞诱导形成的应激颗粒(Stress Granules,SGs)可以抑制病毒的增殖过程。并且,病毒感染细胞早期可以促进应激颗粒的形成,感染后期可抑制应激颗粒SGs形成。EV-D68通过自身非结构蛋白2A蛋白剪切了SGs标志蛋白G3BP1而抑制SGs形成。为了更加深入探究SGs参与调控病毒增殖过程的机制,本研究设计实验分析了SGs蛋白与病毒基因组相互作用的关系,发现了SGs的组分之一TIA-1蛋白与EV-D68病毒基因组5’UTR结构存在明显的相互作用,TIA-1蛋白可以通过5’UTR结构调控病毒蛋白翻译水平,进一步揭示了SGs具备抗病毒功能。法匹拉韦T705是一种广谱抗RNA病毒小分子抑制剂,在研究T705抑制肠道病毒EV-D68增殖的过程中,本研究通过药物学与生物学结合的研究技术确定了T705在使用时的安全浓度,进一步筛选出抑制肠道病毒D68的有效浓度200μM。通过测定半数抑制有效浓度准确评估了T705抗肠道病毒D68的活性,与已经研究过的其他种病毒比较,T705抑制肠道病毒D68的能力较强,这为后续研究提供了保障,在治疗肠道病毒D68导致的疾病方面具有重大临床意义。本文中所论述的实验结论不仅丰富了人类对肠道病毒D68感染机制的认识,而且有助于我们充分了解免疫应答机制通路,为预防和治疗肠道病毒D68感染提供了线索。