目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）X蛋白（HBx）对胰岛素样生长因子-II（IGF-II）基因P3启动子驱动的mRNA表达的影响及其表观遗传机制。方法：①分别采用定量RT-PCR和亚硫酸氢盐测序法检测HBV感染阳性和阴性肝癌组织中P3mRNA、HBx mRNA表达水平及P3启动子甲基化状态，并分析其临床病理特征；②进一步分析稳定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx及其对照细胞株HepG2-control中P3mRNA表达水平及P3启动子甲基化状态；③最后将体外甲基化的IGF-II基因P3启动子驱动的荧光素酶报告载体pGL3-P3及携带HBx基因的pCMV-tag2B-X质粒共转染HepG2肝癌细胞，采用亚硫酸氢盐测序法及双荧光素酶试验检测HBx蛋白对P3启动子转录活性和甲基化状态的影响。结果：①与HBV阴性的肝癌组织相比，HBV阳性的肝癌组织中P3mRNA水平及P3启动子17个CpG位点的平均甲基化水平分别表现为增高与降低；P3mRNA丰度与HBx mRNA表达水平呈正相关，而与P3启动子甲基化水平呈负相关；HBV阳性的肝细胞癌患者更容易形成门静脉癌栓且癌组织分化程度更低；②在HepG2-HBx及其对照细胞HepG2-control中，也显示了类似的P3mRNA表达水平及P3启动子甲基化水平变化；③体外转染的HBx蛋白显著降低了P3启动子甲基化水平，提高了其转录活性。结论：HBx蛋白可能通过降低P3启动子甲基化水平进而促进肝细胞癌IGF-II基因表达，有HBx蛋白表达的肝细胞癌患者可能有较差的临床结局，本结果为充分理解HBx蛋白介导的肝细胞癌发病机制提供了新的信息。