沙门氏菌检测试剂盒与设备应用研究

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近些年来,食品安全已成为全球关注的热点。由微生物污染所引起的食源性疾病是食品安全问题中不容忽视的一点。食源性致病菌的检测是食源性疾病预防和控制的关键节点。随着科技的进步,食品检测技术在不断朝着准确化、效率化、多元化的方向发展。纳米技术是近年来出现的一门高新技术,在生物化学、分子生物学、细胞生物学、基因组学、蛋白质组学、医学诊断、药物筛选和细菌检测标记等方面有着广泛的应用。本研究以现行的食品安全国家标准沙门氏菌检验(GB/T4789.4-2010)和地方标准(DB31/T455-2009)为基础,构建了沙门氏菌磁珠富集、量子点标记的可视化筛选检验检测试剂盒,并对试剂盒的生产工艺、质量控制标准、验证方法等进行了研究。制备得到的沙门氏菌检测试剂盒中包括:以Fe3O4为核心,外层包裹二氧化硅,带有氨基,连接有兔抗沙门氏菌多克隆抗体的免疫功能化磁珠,连接有兔抗沙门氏菌多克隆抗体的免疫功能化量子点,Buffer1(pH=6.0)和Buffer2(pH=7.2)。本研究对试剂盒的生产进行了质量控制,确定了免疫功能化磁珠的最佳粒径、最佳浓度、最佳加液量和使用次数。该试剂盒对沙门氏菌的最低检测限为103CFU/mL,在4℃下可保存三个月,性状稳定,检测结果可靠。实验结果显示该试剂盒能特异性检测沙门氏菌,实现对沙门氏菌的可视化筛选检测。同时本研究设计了一种生物样品磁富集仪BN10-CXY-1,可大大缩短检测时问,快速免疫浓缩纯化大容量样品中的沙门氏菌。与沙门氏菌荧光量子点筛选分离试剂盒配合使用可实现生物样品的大容量、自动化检测,提高灵敏度,满足食品安全领域快速检测的要求。
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