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轮状病毒(Rotavirus,简称RV)作为人和动物腹泻的主要病原体,其基因组由11个分节段的双链RNA片段组成,可编码6个结构蛋白(VPs)和6个非结构蛋白(NSPs)。RV为无包膜的正二十面体颗粒,含3层病毒衣壳,属于呼肠病毒科(Reovirudae)。根据组抗原蛋白VP6的血清型可以将现有RV分为8个组(A~H),其中A,B,C和H组的RV可对人类造成感染。其中A组RV(RVA)是引起婴幼儿病毒性腹泻的主要病原体。根据病毒的11条RNA的编码框(ORF)核苷酸序列同源程度,可将RVA的基因分为不同的基因型。目前非糖基化刺突蛋白VP4和糖蛋白VP7编码基因至少有27个G型(VP7)和37个P型(VP4)。VP6是RV组抗原蛋白,位于病毒的中间层衣壳,最保守,并具有较强的抗原交叉反应性;丰度最高,约占病毒结构蛋白重量的39%。 脊髓灰质炎病毒(Poliovirus,简称PV)属于微小核糖核酸病毒科(Picornaviridae),肠道病毒属(Enterovirus)。基因组为正向单链RNA,约7.5kb,是一种由60个结构蛋白构成的二十面体病毒颗粒,可编码VP4、VP2、VP3和VP1共4个结构蛋白以及2A、2B、2C、3A、3B、3C和3D共7个非结构蛋白。根据脊髓灰质炎病毒毒株的不同抗原性,PV被分成了Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ三种血清型(PV1,PV2,PV3),三种血清型之间无交叉免疫反应。人是脊灰病毒唯一的自然宿主,会导致肢体肌肉发生不对称弛缓性麻痹,也称小儿麻痹症。 由于现有的RV和PV疫苗都存在一定的弊端,所以研发新的疫苗是当今趋势。本研究通过基因克隆和重组技术将PV3的一个抗原表位插入到作为载体的RVVP6蛋白上构建嵌合蛋白6F/PV3N1,嵌合蛋白在大肠杆菌中表达并通过、Western-blot试验检测其免疫学性质。研究结果为开发新型可预防RV和PV感染的疫苗提供了非常有用的依据。