【摘 要】
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通过对全国范围艾滋病毒分子流行病学调查研究,我们发现B和C亚型HIV-1在中国发生了重组,并观察到了B/C重组毒株在传播过程中逐步取代了产代B和C亚型HIV-1,这一发现提示杂交后
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通过对全国范围艾滋病毒分子流行病学调查研究,我们发现B和C亚型HIV-1在中国发生了重组,并观察到了B/C重组毒株在传播过程中逐步取代了产代B和C亚型HIV-1,这一发现提示杂交后的重组病毒可能具有了某种传播优势.在比较了120余个tat基因的序列后,发现中国B/C重组毒株tat基因的变异类型可分为三类,分别与感染者血浆中的病毒载量的高低相对应,强裂提示tat基因的变异与病毒的生物学特性具有一定的关系.为阐明tat基因的变异与其表型之间的关系,该文分别选取Tat蛋白三种不同变异类型的典型样品为模板,采用套式PCR的方法扩增目的片段,然后将其连接在原核表达载体pET30a上,利用T7 RNA聚合酶表达系统在E.ColiBL21(DE3)中高效表达目的基因,并通过金属鏊合层析的方法纯化Tat蛋白.经Western Bolt鉴定后,利用荧光素酶检测系统,在体外对Tat蛋白进行生物学活性检测.分别把不同变异类型的Tat蛋白与报告质粒pHIVLTR-luc共转染HeLa细胞,测定不同的Tat蛋白对HIV LTR的反式激活活性,从而来验证Tat蛋白的公安厅变对病毒生物学特性的影响.
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