不同光质下喜树愈伤组织诱导分化及生理生化的基础研究

来源 :杭州师范大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:saoluan
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喜树(Camptotheca acuminata Decaisne)为珙桐科(Nyssaceae)喜树属植物,落叶乔木,高达25-30m,主要分布于长江流域以南、海拔1000m以下的林边、溪边或校园。喜树不仅是一种优良绿化树种,并且因为其含有抗癌作用的生物碱:喜树碱和10-羟基喜树碱而受到高度关注。本文因喜树分布于海拔1000m以下这个特性,在不同光质下分别以无菌叶片、茎段为外植体,对外植体愈伤诱导、分化进行了研究,并对喜树愈伤组织分化的生理生化进行了基础分析,探索喜树愈伤在不同培养基和光质下的可分化潜力,为喜树进一步的遗传转化、细胞培养、植株再生和次生代谢产物获取提供一定的理论基础。主要研究结果如下:1.研究了MS、1/2MS、WPM和SH四种培养基在红、白、蓝三种光质下对愈伤组织的诱导状况,最佳愈伤诱导条件为:蓝光下SH+1.0mg·L-1NAA+0.075mg-L·-1TDZ培养基,愈伤组织出愈率为100%,致密的绿色愈伤组织,无褐变。2.在不定芽诱导时,茎段与叶片的诱导率存在较大差别,茎段的诱导率明显高于叶片。生长素对比中,NAA对于茎段的芽分化效果好于IAA,在叶片的芽诱导中,IAA的效果好于NAA。茎段的最佳诱导条件:蓝光下SH+1.0mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA培养基上;叶片的最佳诱导条件为:白光下SH+2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1IAA,诱导率分别为24.1%和18.3%。3.在愈伤组织分化潜力研究方面:(1)单一红光SOD酶活一直处于较低状态,蓝光及混合光的照射对SOD酶活的影响差异不大,第7天达到峰值,之后持续下降。(2)第7天POD酶的活性均有下降,蓝光下的酶活性最低,仅约为白光下的1/3;而在第7-14天,蓝光下POD酶活性有显著提高,在14天左右达到培养过程中的峰值。在蓝光照射下,愈伤组织中POD酶的活性变化和SOD酶的变化正好相反,在第7天左右喜树愈伤组织具备更强的器官分化能力。
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