低密度脂蛋白对冻融后猪精液生物学特性的研究

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本研究的主要目的是评价蛋黄中低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)对冻融后猪精子生物学特性的影响及LDL对冻融后猪精子DNA完整性及受精率的影响。以手握法采集的猪精液为试验材料,进行处理后,用0.25ml细管进行了冷冻试验。试验主要分3步进行:Ⅰ以三种不同的离心速度提取蛋黄中的低密度脂蛋白,分4个(7、8、9和10% LDL)处理组,冻融后对精液品质进行生物学检测;Ⅱ不同浓度LDL添加后以单细胞凝胶电泳分析法,对冻融后的精液进行DNA完整性检测;Ⅲ不同浓度LDL添加后,冻融后的精液与成熟卵母细胞进行体外受精(IVF),检测其受精率。试验结果如下:  1、用三种不同的(10000转/min、8000转/min和12000转/min)离心速度提取蛋黄,然后在猪精液冷冻稀释液中添加不同浓度(7%、8%、9%、10%)LDL。以10000转/分离心速度离心的LDL,其冻融后猪精子的活率、顶体的完整率和质膜完整性显著高于8000转/分和12000转/分的(P<0.05),4个处理组中9%LDL处理组冻融后猪精子的活率、顶体完整率和质膜完整性显著高于其它三个处理组(P<0.05)。  2、冷冻稀释液中添加不同浓度(7%、8%、9%、10%)LDL对猪冻融后的精子进行了单细胞凝胶电泳分析,以检测冷冻对猪精子 DNA的损伤。添加浓度为9%的LDL,冻融后猪精子DNA损伤程度最小,浓度为7%、8%和10%的LDL,猪精子DNA损伤程度逐渐增大。4个处理组中9%LDL冻融后DNA完整率显著高于其它三个处理组(P<0.05)。  3、不同浓度(7%、8%、9%、10%)LDL对猪冻融后的精子进行了体外受精,以观测受精后的卵裂率。9% LDL(10000转/min)处理组冻融后猪精子体外受精率为46.35%,显著高于其它三个处理组(P<0.05)
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