【摘 要】
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以蛋白质为基础的分析生物器件,如传感器和生物芯片等,为人们提供了有效的分析技术平台.而蛋白质固定的均质性则是评估分析生物器件质量的一个主要指标.因此,该实验以两种蛋
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以蛋白质为基础的分析生物器件,如传感器和生物芯片等,为人们提供了有效的分析技术平台.而蛋白质固定的均质性则是评估分析生物器件质量的一个主要指标.因此,该实验以两种蛋白质为模式蛋白研究蛋白质固定的均质性问题.通过基因操纵构建融合蛋白Protein-Linker-Cysteine.在此设计中,半胱氨酸提供的自由巯基能够在金表面形成Au-S键,在巯基修饰的玻片表面形成-S-S-键实现蛋白质的均质定向固定;Linker可减少基因修饰对蛋白质折叠的影响.构建表达载体pET-BLC,pET-BL.将其转化进大肠杆菌AD494中.原子力显微镜研究整合有磷脂和经抽提去掉磷脂的蛋白在金表面的固定.原子力显微镜图像显示融合蛋白BLC能够利用Au-S键在金表面形成均匀固定,而野生型蛋白在金表面不能形成均匀的固定.蛋白质在金表面的固定受金表面拓扑结构和磷脂的影响.
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