利用iTRAQ及ELISA技术研究HPX和AHSG与急性脑梗死的相关性

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目的:应用同位素相对标记与绝对定量技术(ITRAQ)联合双向液相色谱与串联质谱(2D-LC-MS/MS)对急性脑梗死(Acute ischemic stroke,AIS)患者以及正常对照组(The controls)血清中蛋白质进行定量分析,筛选出差异表达蛋白,并对筛出的部分差异蛋白进行酶联免疫吸附法(ELISA)验证。方法:采集急性脑梗死患者以及正常对照组血清,应用ITRAQ联合2D-LC-MS/MS技术,筛选出差异蛋白并进行分析,对其中筛选出的血红素结合蛋白(Hemopexion,HPX)、胎球蛋白-A(Alpha-2-HS-glycoprotein/Fetuin-A,AHSG/FA)2种蛋白进行ELISA验证。结果:共鉴定出29种差异蛋白(9种上调蛋白,20种下调蛋白)。DAVID生物学功能分析以及蛋白质功能相互作用网状图提示AHSG、HPX是急性炎症反应相关蛋白。对AHSG、HPX经行ELISA验证,发现AHSG(AIS组:424.0±113.3 mg/L,对照组:526.9±124.0,P=0.001)和HPX(AIS组:810.9±164.1 mg/L,对照组:954.8±85.6 mg/L,p<0.001)表达均降低,与质谱结果一致。结论:AHSG、HPX在急性脑梗死患者血清中浓度降低,可能成为急性脑梗死的潜在的治疗靶点和生物学标志。
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