葡萄籽提取物体外对前列腺癌PC-3细胞作用的实验研究

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葡萄籽提取物(grape seed extract,GSE)是从葡萄的种子中提取出来的一种多酚类物质混合物,具有诱导肿瘤细胞凋亡的生物和药理学活性。目的:研究GSE对前列腺癌PC-3细胞的生长抑制及凋亡作用,分析GSE诱导PC-3细胞的凋亡途径;观察GSE对放射治疗PCa的增敏作用。方法:(1)四唑盐(MTT)比色法测定GSE对PC-3细胞毒性作用。(2)倒置显微镜、透射电镜观察GSE对PC-3细胞引起的形态学改变。(3)碘化丙啶(PI)、吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)和Annexin V-FITC/PI双染法观察GSE诱导的PC-3细胞凋亡作用。(4)western blot探索细胞凋亡途径。(5)流式细胞仪(FCM)检测GSE对放射疗法的增敏作用。结果:(1)四唑盐比色法显示GSE显著抑制PC-3细胞生长。(2)倒置显微镜、透射电镜下可见细胞形态改变。(3)PI染色显示,GSE将PC-3细胞周期阻滞在G0/G1期;Annexin V-FITC/PI双染显示,GSE诱导PC-3细胞凋亡、坏死;AO/EB染色显示,荧光显微镜下可明显看到凋亡细胞、死亡细胞。(4)western blot显示GSE通过caspase-3途径诱导细胞凋亡。(5)GSE可增加PC-3细胞对辐射的敏感性,且改变了辐射后PC-3细胞的阻滞周期。结论:本研究从细胞和亚细胞水平研究了GSE对前列腺癌PC-3细胞的作用。通过对PC-3细胞生长实验研究和形态学观察,首次证明了GSE对人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞具有毒性作用,GSE可通过caspase-3途径诱导PC-3细胞凋亡和坏死,抑制细胞生长;同时,GSE可增加PC-3细胞对辐射的敏感性。
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