油污土壤石油降解真菌的分离、鉴定与降解效果分析

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随着现代石油工业的发展,石油的环境污染问题越来越突出,微生物修复技术被公认为是治理石油污染的较好方法,研究发现,获得高效、广谱、稳定、适应性强的石油降解菌株以及配套治理工艺是利用该技术进行石油污染治理的关键。生物修复技术是一种利用微生物的降解作用来实现恢复石油污染土壤生态系统的技术,其处理成本约为传统的物理化学方法的1/3-1/5。该技术由于其具有处理成本低、没有二次污染、处理条件温和等良好的技术特点,受到广泛重视并得到飞速发展,已经成为目前国内外环境治理技术的研究热点,有望成为十分有前景的环境污染治理的替代技术。本文从大庆油田长期被石油污染的土壤中采集土壤样品,从石油污染的土壤中分离纯化出3株生长稳定的真菌菌株,并对其进行生长理化性质的测定;通过ITS序列分析对3种真菌菌株进行鉴定;以石油为唯一碳源,对3株真菌在液体培养基和土壤中对石油降解的效果进行测定。试验结果如下:1.通过对大庆油田石油污染土壤中真菌的筛选,选出3个生长快稳定的真菌菌种,分别编号为3号菌种,4号菌种和6号菌种。对3个菌株的理化性质分析发现,3个菌株均有耐碱性的特点,并且在酸性条件下不能快速生长。在真菌生长过程中较高的温度会抑制菌丝的生长。2.利用分子生物学方法,对三株真菌进行DNA的提取,并将PCR产物送到上海生物公司进行ITS序列测定并完成测度结果的拼接对。得到结果为:3号真菌—Fusarium oxysporum(尖孢镰刀菌);4号真菌—Fusarium solani f. radicicola(腐皮镰刀菌);6号真菌—Mucor circinelloides f. circinelloides(卷枝毛霉菌)。3. 3株真菌均能对石油进行降解,且降解效果良好。3号真菌Fusarium oxysporum液体培养基条件下降解效率为79.07%,以人工油污土壤作培养基的降解效率为68.14%;6号真菌Mucor circinelloides f. circinelloides液体培养基条件下的降解效率为71.48%,以人工油污土壤作为培养基的降解效率为64.51%;,4号真菌Fusarium solani f. radicicola液体培养基条件下降解效率为75.93%,以人工油污土壤作培养基的降解效率为71.51%;混合菌种液体培养基条件下降解效率为74.65%,以人工油污土壤为培养基的降解效率为68.77%。
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