基于LC-MS技术探讨养阴祛湿化瘀方对高尿酸肾病大鼠特异代谢物的影响

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Aiming
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目的:研究养阴祛湿化瘀中药组方对高尿酸性肾病(hyperuricemic nephropathy,HN)大鼠尿酸(uric acid,UA)、肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea ni trogen,BUN)的影响以及通过药物干预后各组大鼠血清代谢物的变化,针对血清差异代谢物,找出相关代谢通路与潜在的标志物,从而揭示该方治疗HN的作用机理。方法:54只SD雄性大鼠随机选取11只为空白对照组,其余大鼠采用氧嗪酸钾联合腺嘌呤灌胃法建立HN大鼠模型。造模后随机分为模型组、养阴祛湿化瘀方中药高、中、低剂量组(TCM-H,TCM-M,TCM-L)及别嘌醇组,给予相应药物干预。灌胃结束后腹主动脉采血,测定各组大鼠肾功能(UA、Cr、BUN)水平,分析各组指标之间差异。同时采用LC-MS技术对各组大鼠血清进行代谢组学分析,筛选出的差异代谢物可作为HN潜在的代谢标志物,并以此建立相关的代谢通路。结果:肾功能结果表明,与正常组比较,模型组大鼠UA、Cr、BUN指标均有明显升高,经中药干预后各组大鼠肾功能指标相较于模型组均有不同程度的降低,其中仅中药中剂量组对UA、Cr、BUN指标均有明显减低(P<0.05,P<0.01)。中药低剂量组仅对UA、BUN降低有统计学意义,中药高剂量组仅对UA、Cr降低有统计学意义。对于UA指标下降程度,别嘌醇组明显优于各中药组(P<0.05),中药组间比较高、中剂量组要优于低剂量组(P<0.05)。代谢组学结果表明,与空白对照组比较,模型组血清代谢物中PC(18:1(9Z)/18:1(9Z))、PI(16:0/22:4(10Z,13Z,16Z,19Z))、亚油酸等9种代谢物水平均较正常组上调。而PC(14:0/22:1(13Z))、SM(d18:0/22:1(13Z))和l-苯丙氨酸等20种代谢物则表现为下调。通过药物干预后筛选的差异代谢物构建出养阴祛湿化瘀中药方治疗HN最相关的代谢通路。高剂量组差异代谢通路主要有甘油磷脂代谢通路,氨酰t RNA生物合成代谢通路,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成代谢通路,亚油酸代谢通路,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成代谢通路;中剂量组有甘油磷脂代谢通路,亚油酸代谢通路,精氨酸生物合成通路;低剂量组有甘油磷脂代谢通路,亚油酸代谢通路。结论:持续高尿酸状态对肾脏造成一定的损害,其发病可能与脂质及氨基酸代谢异常有关。养阴祛湿化瘀方具有调节脂质代谢、氨基酸代谢紊乱等问题,通过调节HN大鼠体内的甘油磷脂代谢通路、亚油酸代谢通路及氨基酸代谢通路等代谢通路改善机体的代谢失衡问题,起到保护肾脏的作用。
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