基于荧光共振能量转移和超高效液相色谱-串联质谱在硫普罗宁和雌激素分析检测中的应用研究

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硫普罗宁(Tiopronin,TP),由于其活性巯基对肝细胞的保护和治疗作用,被广泛应用于肝类疾病的治疗中。近年来硫普罗宁的应用范围不断扩展至皮肤类疾病、抗风湿治疗以及降低放疗、化疗的副作用。而如何快速、准确、便捷地测定硫普罗宁的含量成为重要问题之一。雌激素是一种类固醇激素,在环境中一般很难降解,因此导致了土壤和水体等环境中的雌激素污染可能会富集到食物链中。长期摄入雌激素类物质会导致人体的内分泌系统发生紊乱,同时对于生殖系统产生影响,此外还会引发癌症等。因此建立食品中雌激素残留的检测方法是非常必要的。基于以上问题,本文研究了基于荧光共振能量转移效应的硫普罗宁测量方法和超高效液相色谱-串联质谱检测蜂蜜中雌激素残留的分析方法,具体内容如下:第一章分别介绍了硫普罗宁的药效和临床应用,以及雌激素和其危害,并分别对于硫普罗宁及雌激素检测技术的国内外研究现状做了详细介绍。第二章基于荧光共振能量转移效应,建立了使用纳米金(AuNPs)和罗丹明B(RhoB)快速测量硫普罗宁含量的方法,并对原理进行了验证分析。研究中分析了纳米金的用量、纳米金与罗丹明B的反应孵化时间等的主要因素对于实验结果的影响,并对参数进行了优化。研究中发现罗丹明B与硫普罗宁的加入顺序会对于实验结果产生明显影响。先加入硫普罗宁然后再加入罗丹明B,测量灵敏度更好。第三章中为了获得更好的检测效果,建立了基于荧光共振能量转移,使用纳米金(AuNPs)和碳量子点(CQDs)快速对硫普罗宁含量测定的方法,并对实验原理进行了验证分析。研究中同样分析了纳米金的用量及纳米金与碳量子点的反应孵化时间等因素对于实验结果的影响,并对于参数进行优化。结果表明相对于使用纳米金颗粒溶液和罗丹明B测量硫普罗宁含量的方法,该方法线性范围更广,线性更好,检出限更低,回收率及精密度都更好,但选择性略差一些。第四章建立了基于固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱(SPE-UPLC-MS/MS)对蜂蜜中六种环境雌激素(雌酮、雌二醇、雌三醇、炔雌醇、己烷雌酚、双酚A)同时进行测定的方法。针对蜂蜜中雌激素检测基质效应干扰问题,使用四种清洗液对蜂蜜样品进行前处理,并对其用量进行优化,使得检测效果明显提高。方法加标回收率为78.5~112.9%,RSD为0.66~8.86%,方法检出限为0.04~0.19μg/kg,定量限为0.15~0.62μg/kg。第五章对全文进行了总结,并对进一步研究的方向进行了展望。
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