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目的皮肤光老化是皮肤长期受到日光照射所引起的损害,表现为皱纹、皮肤粗糙、干燥、松弛、不规则色素改变、毛细血管扩张,甚至可以发展为良性或恶性肿瘤。强脉冲光(intense pulsed light,IPL)技术作为新一代非剥脱性皮肤美容术,在治疗光老化方面具有很大优势。由于IPL治疗疗程长达几个月,因而季节、化妆品使用、治疗部位皮肤颜色及干燥程度等多种因素可能会对治疗效果产生影响,从而影响疗效判定。本研究创新性地采用Split face模式观察了IPL治疗面部光老化的临床疗效,并行特殊染色及免疫组织化学染色探讨其可能的作用机制。材料和方法一、研究对象符合光老化诊断标准且左右面部皮损相对对称者共41名女性受试者入选本研究,所有受试者面部随机分为治疗侧(给予4次IPL治疗)及未治疗侧(暂不予治疗)。于治疗侧末次治疗结束后4周,对其中19名受试者的左、右面部相对应部位各取一块皮肤组织制成冰冻切片及石蜡切片。二、治疗前准备及治疗过程(一)治疗前准备签署知情同意书。受试者用清水及洗面奶/液清洗面部。温度20-25℃,湿度40-50%的室内休息30分钟。指定照像室照相,留取受试者正面及双侧面脸部照片。(二)治疗过程根据受试者Fitzpatrick分型、肤色、皮损性质、部位、密度等制定个体化治疗方案,选择恰当的IPL治疗参数:波长560nm、590nm或640nm;单、双或三脉冲;能量密度11-18J/cm~2;脉冲宽度2.5-4ms;脉冲延迟时间20-40ms。治疗头通过冷凝胶接触面部皮肤,治疗终点是皮肤潮红反应,治疗结束后冷敷5-10分钟。每次治疗时间约10-20分钟,间隔3-4周进行下一次治疗。嘱受试者治疗期间注意避免日光曝晒,每日外用防晒霜(SPF≥30)及保湿霜。三、疗效评价(一)医生主观评价于治疗侧首次治疗前、末次治疗后4周及3个月随防时医生对左右侧面部面颊、前额、眼周三个部位的细皱纹、粗糙度、色素不均匀等给予0-4分的整体评分。(二)受试者满意度评价于治疗侧末次治疗结束后4周受试者对治疗侧面部治疗效果自评,分为非常满意、满意、一般、不满意四个等级。将非常满意及满意计入满意率。(三)客观评价1、非创伤性评价于治疗侧首次治疗前、每次治疗后4周及3个月随防时,对受试者面部10个部位(双侧眉正中上方1cm简称额部、双侧眼外眦旁1cm简称眼部、双侧颧骨最高部位简称颧部、双侧唇旁1cm简称嘴部、双侧下颌正中与嘴角连线中点简称颌部)进行黑素指数(melanin index,MI)和红斑指数(erythema index,EI)测定,每个部位测5次,取平均值;对受试者双侧颧骨最高部位进行角质层含水量测定,每个部位测10次,取平均值。2、病理取材皮肤的评价(1)石蜡切片L-DOPA法染色,计算多巴阳性细胞线性密度。(2)冰冻切片NK1β免疫组织化学染色,计算NK1β阳性细胞线性密度。(3)石蜡切片Schmorl法和Fontana Manna法染色,计算含黑素颗粒细胞密度及黑素含量指数(melanin content index,MCI)。(4)石蜡切片苏木精-伊红染色、Verhoeff铁苏木素染色及显示弹力纤维和胶原纤维的双重组合染色,分别观察真皮胶原纤维或/及弹力纤维含量。四、统计学分析采用SPSS 11.5 FOR WINDOWS进行统计学分析。服从正态分布资料采用t检验,服从偏态分布资料采用Mann-Whitney非参数检验;P＜0.05为有统计学差异。结果一、IPL治疗对医生主观评分的影响未治疗侧各时间点无差异。与治疗前相比,治疗侧每次治疗后评分均有不同程度下降,且差异均有统计学意义。二、受试者满意度自评非常满意11例,满意26例,一般4例,不满意0例,满意率为90.24%。三、IPL治疗对MI/EI值的影响(一)MI/EI均值未治疗侧各时间点无显著差异。与治疗前相比,治疗侧MI均值于第1次、第4次治疗后和3个月随防时显著下降;EI值于各次治疗后虽有不同程度下降,但差异无统计学意义。(二)MI/EI差值每次治疗后,治疗侧MI差值均显著大于未治疗侧的。第1次、第4次治疗后和3个月随防时,治疗侧EI差值显著大于未治疗侧的。四、IPL治疗对角质层含水量的影响与治疗前相比,未治疗侧/治疗侧面部角质层含水量均无统计学差异。五、IPL治疗对黑素细胞及黑素颗粒的影响1、未治疗侧与按受IPL治疗侧多巴阳性细胞及NK1β阳性细胞线性密度无统计学差异。2、与未治疗侧相比,IPL治疗侧含黑素颗粒细胞密度显著下降。3、与未治疗侧相比,IPL治疗侧MCI-1和MCI-2目标面积/场面积比值(%)及平均光密度值显著下降。六、IPL治疗对胶原纤维及弹力纤维的影响1、与未治疗侧相比,IPL治疗侧胶原纤维面密度及积分光密度均显著升高。2、未治疗侧与治疗侧弹力纤维面密度及积分光密度无统计学差异。未治疗侧弹力纤维有的断裂、排列紊乱或聚集成团,而治疗侧弹力纤维基本与胶原纤维平行,成波浪形排列。结论1、IPL治疗可显著降低光老化皮肤医生主观评分及MI/EI值,对角质层含水量无影响,患者满意率高,因而IPL可安全而有效地改善皮肤细皱纹、粗糙、干燥、不规则色素改变、红斑或毛细血管扩张等面部光老化状态。2、IPL治疗可有效地清除表皮大量的黑素,从而治疗光老化皮肤不规则色素沉着;但对黑素细胞活性则无影响。3、IPL治疗使光老化皮肤胶原纤维增多、弹力纤维排列正常化,从而一定程度上恢复皮肤胶原含量及改善皮肤弹性。