中国野生蓝莓及其总花青素保肝效果的研究

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:slovedw520
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中国野生蓝莓,又名笃斯越桔(Vaccinium uliginosum)是杜鹃科越橘属多年生灌木或野生落叶灌木。蓝莓经济价值不菲,有很大的开发潜力。我国主要在东北地区及其一些周边地带生长有大范围的蓝莓灌木丛。目前,国内针对野生蓝莓新产品的创新研制工作已经得到很好的开展。与海外相比,研发规模与档次还明显不足,依然有很多方面处于空缺状态。国内特别在野生蓝莓及其总花青素的多种生物活性方面的探索比较落后。针对中国野生蓝莓开发的发展状况以及对比国外野生蓝莓的发展研究,本文在借鉴了吴献礼老师蓝莓总花青素高效提取研究的基础上针对性地做了中国野生蓝莓及其总花青素各方面保肝效果的研究。第一部分叙述了蓝莓总花青素的提取纯化方法发展以及各生物活性方面的研究,但针对其保肝作用的探索尚未发现有成体系的报道和研究。为了进一步探究中国野生蓝莓的功能特性,本研究借鉴了吴献礼老师的研究方法,从中国野生蓝莓中提取总花青素,并使用XAD-7大孔树脂进行纯化后进行中国野生蓝莓及其总花青素的各项生物活性研究:第二部主要分采用体外抗氧化试验、小鼠耳足肿模型抗炎试验、AlamarBlue法进行模拟体外抗肿瘤试验。结果显示,利用新方法从中国野生蓝莓种获得的总花青素具有显著的体外抗氧化能力,且抗氧化能力与其浓度呈现正相关;其中当浓度为800μg/mL时,总花青素对超氧阴离子产生的清除率是86.86%,当浓度为100μg/mL时,总花青素对双氧水自由基产生的清除率是73.93%;同时中国野生蓝莓总花青素也具有良好的抗炎能力,在灌胃剂量为100μg/g时,对小鼠耳廓肿胀产生的抑制效果为47.04%,小鼠足部肿胀抑制在第4小时可以达到最大作用;同时中国野生蓝莓总花青素也有显著的体外抗肿瘤活性,白血病细胞K562增殖受到的抑制较为明显,其IC50为79.01μg/mL。第三部分通过小鼠慢性非酒精性肝损伤模型对中国野生蓝莓及其总花青素的保肝效果进行评价。结果显示,中国野生蓝莓在20g/kg/day-40g/kg/day的范围内有一定的保肝效果;中国野生蓝莓总花青素在0.012g/kg/day-0.024g/kg/day的范围内有较好的保肝效果,且对高脂饲料带来的肥胖有更好的抑制效果。第四部分采用小白鼠慢性酒精性脂肪肝模型进行中国野生蓝莓及其总花青素保肝效果的评价。结果显示,中国野生蓝莓在20g/kg/day-40g/kg/day的范围内,具有一定的保肝效果,和中国野生蓝莓总花青素在0.006g/kg/day的效果相似;中国野生蓝莓总花青素在0.012g/kg/day-0.024g/kg/day之间,有很好的保肝效果,但不能很好的提高慢性酒精性脂肪肝小鼠的体重和进食量。第五部分采用氯化镉诱导的小白鼠慢性肝损伤模型,进行蓝莓总花青素对慢性氯化镉诱导的小鼠肝损伤的保肝效果探究。结果显示,蓝莓总花青素在1.0mg/kg/day-50mg/kg/day的范围内,有一定的保肝效果;在1.0mg/kg/day-40mg/kg/day的范围内,随着蓝莓总花青素用量的增加,Cd2+在肝内的积蓄随之减少,保肝效果越好;结果还显示,与中国野生蓝莓总花青素40mg/kg/day的用量相比,50mg/kg/day的中国野生蓝莓总花青素并不能进一步减少Cd2+积蓄,所显示出的保肝效果与40mg/kg/day相同。第六部分采用小白鼠慢性非酒精性脂肪肝模型,探究中国野生蓝莓和中国野生蓝莓总花青素的有效保肝范围。结果显示,中国野生蓝莓在5g/kg/day-60g/kg/day的用量情况下,对慢性非酒精性脂肪肝小鼠体重增长有一定的抑制作用,且能体现出一定的保肝效果,其中在中国野生蓝莓40g/kg/day的用量时,小白鼠体重控制和保肝效果是最好的。但中国野生蓝莓在50g/kg/day-60g/kg/day的用量时,和小鼠40g/kg/day组分小鼠进行比较,小鼠体重呈现增长情况,且随着用量增加,保肝效果越差;中国野生蓝莓总花青素方面,在4mg/kg/day-50mg/kg/day的用量范围内对小鼠非酒精性脂肪肝有较好的保肝作用,且随着中国野生蓝莓总花青素用量的提升,保肝效果也越明显,中国野生蓝莓总花青素的用量在40mg/kg/day-50mg/kg/day范围时,达到最好的保肝效果,但比较40mg/kg/day-60mg/kg/day三组小鼠,结果显示了很大的相似性,所以可以推断中国野生蓝莓总花青素用量在40mg/kg/day时,保肝效果达到极限,继续添加蓝莓总花青素不会产生进一步地保肝性。研究表明中国野生蓝莓及其总花青素有着多样的生物活性,对于非酒精性脂肪肝、酒精性脂肪肝和氯化镉造成的肝损伤有着比较好的活性。其中,对于非酒精性脂肪肝的保肝效果方面,中国野生蓝莓的有效保肝用量的范围是5g/kg/day-60g/kg/day,最优推荐用量为40g/kg/day,蓝莓总花青素的有效保肝用量的范围是4mg/kg/day-50mg/kg/day,最优推荐用量为40mg/kg/day-50mg/kg/day。此外,本研究还存在一定的不足,对于中国野生蓝莓总花青素的肝脏毒性并没有进行探究,对其保肝的极限值原理也不能做出很好的解释,这些都有待在将来的研究中一一进行验证。
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