离子交换树脂分离纯化大豆磷脂酰胆碱的研究

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磷脂酰胆碱(PC)是一种磷脂,具有特殊的理化性质和生理功效,广泛应用于食品、医药、化妆品等领域,尤其在作医药乳化剂和脂质体制备方面具有广阔的前景。论文针对高纯度磷脂酰胆碱制备的树脂柱层析法进行了系统的研究。确定了大豆磷脂酰胆碱的HPLC-UV检测方法。分析条件如下:色谱柱为lichrospher Si (25cm×4.6mm,5μm);流动相为A-正己烷/异丙醇(V/V)=1:1,B-正己烷/异丙醇/1%冰醋酸水溶液(V/V/V)=4:4:1;流速:1.0mL/min;柱温:35℃;检测波长:205nm。此条件下,磷脂中的磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺25min内得到了很好的分离。经检测,原料醇溶磷脂中含磷脂酰胆碱40.08%(wt%)、磷脂酰乙醇胺19.1%(wt%)。以醇溶磷脂为原料,重点研究了大孔型离子交换树脂S分离纯化磷脂酰胆碱的工艺,考察了各工艺因素对磷脂酰胆碱分离纯化效果的影响,确定最佳的吸附和解吸条件为:进样液浓度3mg/mL左右、吸附流速1mL/min、最佳洗脱剂为95%乙醇、洗脱流速1mL/min。在此条件下,可得到浅黄色的塑状PC产品,其纯度为94.02%(wt%),得率为80.74%。通过对磷脂酰胆碱吸附动力学研究表明,吸附过程可以采用未反应核收缩模型来描述。磷脂酰胆碱的吸附速度由孔内扩散控制,吸附时间与1 - 3(1 - X )2/3+ 2(1 - X)有良好的线性关系。磷脂酰胆碱的吸附等温线可用Langmiur方程表示,相关系数均在0.99以上,实验结果表明吸附反应为放热反应。本文同时采用三氧化二铝柱层析法进行制备磷脂酰胆碱,为了与树脂柱层析法制得的磷脂酰胆碱进行比较,用95%乙醇洗脱,制得的磷脂酰胆碱含量达92.7%(wt%)。对两种PC产品进行比较得到:两者均含有:棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸,而亚油酸含量最高,达65%左右;HPLC-MS分析结果为:产品中均含有16:1/18:1-PC、16:0/18:2-PC、18:2/18:2-PC、18:1/18:2-PC、18:0/18:2-PC和18:2/18:3-PC等六种分子种,两种产品中二亚油酰磷脂酰胆碱的含量均最高。
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