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禾花鲤(Procypris merus),属鲤科温水性鱼类,鱼苗在水稻田中养殖,因主食稻田禾花而得名。禾花鲤最开始发源于桂林市全州县龙水乡和融水县苗山等地,现分布在广西西北部和南部山区一代。禾花鲤为杂食性,生长速度快,繁殖能力强,肉质鲜美,鱼骨柔软无泥腥味,细叶鳞,其背脊部鳞片呈金色,形似一条金边,因而又名金边禾花鲤。本研究旨在探讨人工育苗条件下,禾花鲤仔稚鱼的营养需求及开口饲料的开发,通过本研究可为禾花鱼仔稚鱼的饲料配方设计及制作工艺提供理论基础,为广西禾花鲤产业发展和精准扶贫工作提供科技支撑。现将研究结果总结如下:1、研究了人工池塘养殖过程中,禾花鲤仔稚鱼的口径变化及摄食习性,禾花鲤从孵化出膜后第3天即开口,第3天至第10天为逐渐接受外源性营养摄入的适应阶段,12天后生长速度开始加快。禾花鲤育苗池的浮游动物轮虫数量最多,枝角类和桡足类的数量呈现规律性上下浮动。育苗池浮游动植物数量和种类的变化具有多变性,不仅受到禾花鲤摄食选择的影响,也受到天气和水温等多方面因素的影响。禾花鲤属杂食性鱼类,在仔鱼前期属于杂食偏草食性鱼类,仔鱼后期对浮游动物的采食量有升高趋势,在3-20 DAH适宜的饲料粒径为100-200μm,21-30 DAH适宜的饲料粒径为200-350μm,蓝藻门中的微囊藻属于有害藻类,在育苗池中数量较多,应及时调整水质环境,以达到提高苗种成活率的目的。2、研究了禾花鲤仔稚鱼消化系统的发育过程和组织学结构变化。观察发现,仔鱼孵出后第三天开口,口腔出现杯状细胞,第五天出现咽齿齿囊,第6天消化道发育出纹状缘,标志着仔鱼肠道功能已逐渐完善,第12天出现了核上内容物和核上空泡,这表明此时肠道细胞已经可以进行胞饮作用和细胞内消化,可明显区分出前后肠,肠道发育已基本完成。后期随着鱼体的增大,肠道逐渐增长,弯曲,发育至第30天,禾花鲤仔鱼已经进入稚鱼阶段,其消化系统的形态和功能已经接近成鱼。3、对禾花鲤仔稚鱼不同发育阶段的酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和碱性磷酸酶几个与消化吸收相关的酶活性进行了测定。仔鱼在孵化初期已经具备消化碳水化合物的能力,且糖代谢在这一时期处于相当重要的位置。禾花鲤在开口前即具有较高的淀粉酶活性,高活性淀粉酶可促进藻类的消化,因此,不仅在育苗池培育丰富的浮游动物的同时也要培育一定量的浮游植物,为仔鱼提供丰富的食物来源。禾花鲤仔鱼孵出后第4天和第8天,碱性磷酸酶活性明显上升,这说明在生长至第4天时,肠道在迅速发育,结合消化系统观察的结论,可证明生长至第8天时,禾花鲤肠道已发育较好。4、测定了禾花鲤仔稚鱼早期发育阶段的生化组成变化。仔鱼在第20天的蛋白质含量最高,干重出现先升高后降低的趋势,与干重相同的,禾花鲤仔稚鱼的蛋白质含量也先升高后降低。必需氨基酸比非必需氨基酸更优先于仔鱼的吸收利用,必需氨基酸中的苯丙氨酸和赖氨酸、精氨酸含量显著下降,因此有必要添加足够的营养提高仔鱼生长性能和成活率。禾花鲤仔稚鱼在孵出生长至30日龄这一阶段,C18和C20多不饱和脂肪酸(PUFA)含量持续下降,C22长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)含量持续上升,推测禾花鲤具有自身合成长链多不饱和脂肪酸的能力。对DHA、EPA、AA这三种不饱和脂肪酸的含量变化发现,DHA比EPA和AA更优先的被保留在禾花鲤仔鱼体内,这一结果表明DHA对禾花鲤仔稚鱼的生长发育非常重要。5、研究了38%(组1),41%(组2),44%(组3),47%(组4),50%(组5)5个蛋白水平对禾花鲤仔稚鱼生长和成活率的影响。从本次实验结果来看,组1和组4饲料投喂禾花鲤的蛋白效率最高,组1、组2、组4的特定生长率比其它组分高,各组分成活率差异不大,肥满度未见显著差异,用二次曲线回归方程以禾花鲤仔稚鱼的蛋白质效率作为因变量进行分析,根据公式得出蛋白含量为40.96%时,蛋白质效率最高,用特定生长率作为因变量进行分析,得出蛋白含量为39.67%时,特定生长率达到最大值。因此,推测禾花鲤仔鱼的最适蛋白含量在39.67%-40.96%之间。6、为了更系统的研究饲料蛋白水平对禾花鲤仔稚鱼的影响,从饲料组中选取饲料蛋白水平为38%(A组)、44%(B组)、50%(C组)三组饲料投喂的禾花鲤仔稚鱼进行了转录组测序,采用DEGseq进行差异分析,总体来说A组与C组的差异最大,总共有226个差异表达基因,B组与C组差异较小,共有31个差异表达基因,A组和B组共有87个差异基因。GO注释差异基因的结果表明,不同蛋白水平投喂禾花鲤仔鱼,会引起仔鱼的细胞外区域、细胞膜结构、分子的信号传感器活动的变化。在KEGG富集分析中,其显著差异基因分别富集到了蛋白质消化与吸收、碳水化合物消化与吸收、淀粉和蔗糖代谢、胰腺分泌、半乳糖代谢通路上。显著差异基因包含有PRSS(胰蛋白酶基因)、CTRL(胰凝乳蛋白酶基因)、CPA和CPB(羧肽酶A、B基因)、Amylase(α淀粉酶基因)、G6PC(葡萄糖6磷酸酶基因)、IMA(低聚1,6葡萄糖苷酶基因)、SI(麦芽糖酶基因)等和蛋白质代谢相关的基因及一些转运体,如PEPT1(寡肽转运体家族成员)、SLC6A19(神经递质转运体)。当饲料蛋白水平升高时,以上基因均出现显著上调。结果表明,禾花鲤仔稚鱼可以通过自身调节适应饲料蛋白水平的改变,这种适应性与仔鱼的生长发育密切相关。