基质金属蛋白酶抑制剂对肿瘤细胞典型细胞行为的影响

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:E200902027
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本实验旨在通过对先期经过酶学实验所测得的对基质金属蛋白酶(MMP)家族中的多种酶类有抑制作用的基质金属蛋白酶抑制剂在以分泌此种蛋白酶为主的肿瘤细胞中,对细胞的黏附,伸展,迁移,侵袭,增殖等典型细胞行为的影响,为酶学实验得到的结论提供了细胞学水平的有力证据,也成为进一步研究药物在细胞学水平的作用机制和运用其进行动物体内的抑瘤培养的前提和基础。细胞模型选择能够分泌多种基质金属蛋白酶的纤维肉瘤细胞(HT1080),细胞黏附实验采用显微镜观察后拍照和血细胞计数板计数的方法;细胞的伸展实验分别采用直接孔板培养的二维培养与利用Ⅰ型胶原培养并将细胞悬于其中的三维培养方式;细胞迁移实验采用划线法检测;细胞侵袭实验采用Transwell浸润小室为穿透膜,用Matrigel胶作为浸润基底,用胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)上清为趋化剂进行实验;细胞增殖是采用典型的MTT染色实验进行检测,最后以不同给药浓度为横坐标,以各孔的OD值为纵坐标做出细胞的增殖曲线。体外实验表明,化合物G能够有效抑制肿瘤细胞的黏附能力,减少在相同时间内细胞的贴壁数量,在大约10uM的浓度下,细胞的黏附能力已经受到明显的抑制作用;化合物A能够抑制二维环境培养中细胞的伸展水平,其中没有加入药物的细胞,其伸展面积较大,细胞贴于底壁以后呈煎蛋形状生长,而加入了化合物A的细胞,其伸展较慢,有些还没有伸展的趋势;而化合物D能够
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