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目的肺癌每年的确诊率和死亡率在常见癌症中都是最高的。肺癌转移被认为是造成肺癌患者复发甚至死亡的主要原因。已有大量研究结果表明上皮来源肿瘤通过上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)获得浸润周围组织向远端转移的能力。近年来双硫仑(Disulfiram,DSF)因其广谱抗癌效果而受到广泛的关注。基于以上背景,本研究拟探讨DSF对TGF-β诱导的非小细胞肺癌A549细胞株发生EMT的影响,并对其作用机制初步分析。方法本研究以非小细胞肺癌A549细胞株为研究对象,采用浓度不同的双硫仑及TGF-β处理细胞后开展如下实验:采用MTT实验检测DSF细胞毒性;采用划痕迁移实验和Transwell迁移实验检测细胞发生EMT后的迁移能力改变;采用Transwell小室侵袭实验检测细胞发生EMT后的侵袭能力的改变;通过Western blot检测细胞中EMT相关蛋白(E-cadherin、Vimentin、N-cadherin)的表达改变,并用Western blot检测Snail、ERK1/2、p-ERK1/2的表达来分析DSF通过什么机制影响EMT过程;用ERK通路抑制剂U0126作用于肺癌细胞,来证实DSF是否通过抑制ERK通路从而抑制肺癌细胞的EMT。结果1.MTT实验检测DSF在1μM、2μM、5μM、10μM、20μM的浓度下,都不具有明显的细胞毒性,因此,将用上述浓度的DSF进行进一步实验。2.TGF-β处理后,A549细胞由经典上皮样多边形形态向梭形的间质状态转变。而经不同浓度DSF处理后,细胞形态恢复TGF-β诱导前形态。3.TGF-β处理后,明显促进A549细胞的侵袭和迁移,而与DSF共同处理时,这种作用被抑制,并呈一定的浓度依赖性。4.TGF-β诱导后,细胞上皮标志物E-cadherin表达降低,间充质标志物Vimentin和N-cadherin表达增高,而用不同浓度DSF处理后抑制了这一作用,并随着DSF浓度升高,这种抑制作用就越强烈。5.A549细胞经过TGF-β诱导后,ERK1/2、磷酸化的ERK1/2和Snail的表达升高,而这种作用被DSF抑制。6.U0126是ERK磷酸化抑制剂,它抑制了TGF-β诱导的E-cadherin下调以及N-cadherin和Vimentin的表达上调的改变,且能下调ERK1/2、磷酸化的ERK1/2和Snail。结论DSF能抑制TGF-β诱导的肺癌细胞A549的上皮-间质转化,其机制是通过抑制ERK/Snail通路抑制A549细胞发生EMT。