香蕉(Musa spp.)是最重要的热带和亚热带水果之一,也是仅次于水稻、小麦和玉米的第四大粮食作物。然而香蕉栽培面临着生物和非生物等的逆境胁迫,培育抗病虫、适应性广、高产优质的香蕉品种是从根本上解决此类问题的唯一途径。由于栽培香蕉均起源于M.acuminata(AA型)和M.balbisiana(BB型)的种内和种间的杂交、突变等,所以种质资源中存在A、B基因组构成的多种基因型和多种倍型。香蕉基因组类型和倍型的鉴定对于香蕉的分类以及香蕉遗传改良是非常重要的。传统的鉴定方法是利用植株外部形态学特征来鉴定基因组类型和倍型,但容易受到外部栽培条件和环境因子的影响。本研究利用流式细胞仪和分子标记技术建立香蕉种质资源的基因组类型和倍型快速鉴定技术体系,准确应用在香蕉遗传改良和新品种培育研究中。并对有性杂交后代用原生质体悬滴技术的染色体计数法来准确鉴定倍性。本研究鉴定了232份香蕉资源。国外内收集的资源,大部分都没有进行基因型鉴定,都是通过形态特征来判定的,通过本实验辨别了一些未知基因组类型的品种;纠正了一些错误的基因组类型;并鉴别了一批A与B基因均没有的野生资源;发掘了一批AA、AB和BB类型的珍贵资源,为杂交育种亲本选择提供遗传基础。为品种选育工作提供分子鉴定依据。也通过实验发现,利用IRAP可以进一步研究香蕉种质资源的遗传多样性。主要结果如下:1、建立了基于流式细胞术的香蕉种质倍性鉴定方法。以玉米(Zea mays)作为内参,其2C值为5.43 pg,在此基础上摸索并确立香蕉种质的倍性鉴定方法。利用流式细胞术完成了国家香蕉种质资源圃内183份香蕉种质的倍性分析,其中包括栽培香蕉和野生香蕉以及杂交后代,结果表明:有69个二倍体,91个三倍体,23个四倍体,其中97.1%的实验结果与已报导结果一致,79份(未报导的)国内栽培品种及野生资源与通过形态学特征描述的结果相一致。不同倍性水平的香蕉种质其2C值均在一个范围内,二倍体(2x)平均范围在0.92~1.28 pg;三倍体(3x)平均范围在1.50~1.80 pg;四倍体(4x)平均范围在1.97~2.37 pg。玉米的CV值范围1.5~4.00%,香蕉品种的CV值在2~8%。2、杂交后代的倍性分析和基因组类型鉴定。为了更好地分析杂交后代的倍性水平,而常用的流式细胞术不能准确鉴定其倍性,所以我们采用更为直接的染色体计数法进行倍性分析。通过不同染色体计数法的比较,结果发现原生质体悬滴技术效果最好,可以得到分散较好的分裂中期的细胞,用DAPI荧光染色可以得到清晰的染色体,也解决了香蕉小染色体多倍性难分离的问题。结果表明6个杂交后代中,只有Z-33是三倍体,其余五个都是四倍体。3、利用分子标记完成了232份香蕉种质资源的基因组类型的鉴定。利用基于ITS的PCR-RFLP和反转录转座子间扩增多态性(IRAP)的分子标记技术,采用特异引物扩增出香蕉的ITS区,通过限制性内切酶有效地区分香蕉的A和B基因组类型,确定香蕉种质的基因组类型。结果表明在232份资源中,96%的基因组构成鉴定结果与已报导的结果一致,其中八个品种与已报导的结果不一致,有YJ086(AAAA)、YJ087(AAA),YJ181只含A基因组、YJ203非A非B,YJ193、YJ208含有A及两个或以上B基因组、YJ211只含有A基因组、YJ048含有A、B两种基因组。