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目的:观察缺氧对小鼠角膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)及可溶性fms一样酪氨酸激酶受体-1(soluble fms-like tyrosinekinase-1,sFlt-1)表达的影响并探讨两者之间的关系。
方法:实验用健康雌性成年昆明小鼠,分为缺氧组和正常对照组,缺氧仓的氧浓度为8％-10％,缺氧时间分别为1天、3天、5天、7天、10天、14天。用变性Western blot技术检测小鼠在缺氧条件下角膜组织中总VEGF蛋白表达的变化,用非变性Westernblot技术检测小鼠在缺氧条件下角膜组织中游离及结合的VEGF蛋白表达的变化,用RT-PCR技术检测小鼠在缺氧条件下角膜组织中VEGF、sFlt-1、缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factot-1,HIF-1)的基因表达变化。
结果:缺氧14天内未见小鼠角膜新生血管。缺氧组总VEGF及结合VEGF蛋白表达增加,并且随缺氧时间的延长而增强,与正常对照组差异有统计学意义(P＜0.05),但缺氧14天内均未见游离VEGF蛋白表达。缺氧组VEGF、sFlt-1、HIF-1的基因表达均增加,并且随缺氧时间的延长而增强,与正常对照组差异有统计学意义(P＜0.05),其中VEGF的基因表达与HIF-1的基因表达呈正相关(r=0.993),sFlt-1的基因表达与HIF-1的基因表达呈正相关(r=0.997),sFlt-1的表达与VEGF的表达呈正相关(r=0.983)。正常对照组VEGF、sFlt-1、HIF-1均有少量的基因表达。
结论:缺氧可以诱导小鼠角膜组织中VEGF和sFlt-1表达的增加。缺氧14天内未见小鼠角膜新生血管以及游离VEGF蛋白表达,提示在缺氧的条件下,小鼠角膜组织中VEGF和sFlt-1呈平衡状态。sFlt-1可作为一种内源性VEGF拮抗因子治疗眼部新生血管性疾病。