【摘 要】
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血红蛋白浓度的变化与多种疾病相关,所以制备出一种可以对血红蛋白进行特异性识别和吸附分离的材料十分重要。由于具有比较好的吸附能力及选择性,分子印迹法广为关注。蛋白浓
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血红蛋白浓度的变化与多种疾病相关,所以制备出一种可以对血红蛋白进行特异性识别和吸附分离的材料十分重要。由于具有比较好的吸附能力及选择性,分子印迹法广为关注。蛋白浓度的检测也十分重要。已经报道过的蛋白检测方法有抗原抗体检测法等,但由于价格昂贵,应用仍存在一定的限制,所以需要开发一种价格低廉可以对血红蛋白进行特异性分离并检测的材料。本次研究中制备MIPs选择溶胶凝胶法,该方法制得的MIPs表面具有均匀的印迹孔穴,血红蛋白在MIPs上实现特异性吸附和分离。然后开发了一种可以实现对血红蛋白进行特异性检测的方法,将量子点与分子印迹有机的结合起来,制备以量子点为核的核壳结构的MIPs,并分别对两种聚合物的制备过程及吸附过程进行了一定的研究和考察,有利用实际应用。使用溶胶凝胶法制备MIPs,在无水乙醇为溶剂的环境中,将单体APTES、交联剂TEOS及载体SiO2混合在一起制备MIPs。聚合后使用10%SDS+10%HAc作为洗脱机进行洗脱,洗脱干燥后得到MIPs。从吸附结果可以看出,在MIPs与NIPs吸附8h后,均达到了吸附平衡。当初始吸附的蛋白浓度为2000mg/L时,MIPs和NIPs均为最大吸附量,分别为2331.858mg·g-1,1775.658mg·g-1。MIPs 的最大吸附量大于 NIPs,印迹因子为1.313。使用拟二级动力学模型可以更好地描述MIPs的吸附过程。当MIPs与Hb/Lyz(溶菌酶),Hb/Cyt.C(细胞色素C)三种二元混合溶液接触时,仍表现出对血红蛋白较好的选择。将MIPs进行十次吸附解析的实验,仍有比较好的吸附能力。制备出血红蛋白印迹材料后,结合量子点,实现对血红蛋白的特异性识别。载体选用ZnO QDs,将其与APTES和TEOS混合以制备ZnO@MIPs,然后用0.5%曲拉通—100洗脱,洗脱干燥后得到核壳结构的MIPs。考察ZnO@MIPs的选择性和重复利用性能,发现当ZnO@MIPs与Hb/BSA(牛血清蛋白),Hb/Cyt.C(细胞色素C),Hb/Lyz(溶菌酶)三种混合溶液接触时,仍然可以很好地选择Hb,且效果明显。最后也对ZnO@MIPs的重复利用性进行了考察,经过十次的循环,ZnO@MIPs仍然具有比较好的荧光响应。
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