电化学发光作为电化学方法和化学发光方法相结合的一种技术，具有灵敏度高、线性范围宽、时空可控性好、分析应用范围广等优点。电化学发光免疫检测的市场都主要被罗氏诊断控制，而其电化学发光免疫分析仪及配套的免疫诊断试剂又极其昂贵，因此，自主开发出电化学发光免疫诊断系统就显得尤为重要。目前，国内电化学发光的理论研究已基本成熟，但在实际应用中还有所欠缺。因此，本论文鉴于当前电化学发光检测的现状和满足实验室建立电化学发光体免疫检测方法的需要，构建了一种喷射式流动注射电化学发光分析系统，并将其初步应用到禽流感H9病毒的免疫检测。为了更好的了解本论文的研究背景，第一章简要介绍了当前电化学发光研究的现状和禽流感病毒的检测方法。为了验证此喷射式流动注射电化学发光分析系统用于分析检测的可行性，第二章运用Ru（bpy）₃²⁺/TPA混合进样模式对该系统进行了评估。在最优条件，即检测电位1.18V；进样量100μL；进样速度50μL/s；TPA浓度0.2mol/L，样品缓冲液0.1mol/L（pH8.4）；推动缓冲液0.01mol/L（pH 8.4）下，获得Ru（bpy）₃²⁺最低检出限（S/N=3）为5×10^-9mol/L，线性范围为1×10^-85×10^-6mol/L，RSD为1.02%。结果表明此分析系统灵敏度高，线性范围宽，分析速度快，样品用量少，实现了进样、检测、清洗自动化。为了提高喷射式流动注射电化学发光体系的检测灵敏度，第三章研究了非离子表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚（Triton X-100）对流动注射电化学发光的影响。结果发现，Triton X-100不仅对检测低浓度的Ru（bpy）₃²⁺有增强作用，还可以改变流动注射电化学发光分析系统中Ru（bpy）₃²⁺/ TPA反应电极电位。在检测电位1.35V，进样量100μL，进样速度50μL/s条件下，对Ru（bpy）₃²⁺进行检测，检出限达1×10^-10mol/L （S/N=3），较添加Triton X-100前灵敏度提高50倍。为建立基于喷射式流动注射电化学发光体系的免疫检测方法，第四章利用磁分离和生物素亲和素技术，形成亲和素化磁微球-生物素化抗体-抗原-钌标抗体的免疫夹心复合物，初步建立了体外免疫诊断试剂的制备方法，并利用此喷射式流动注射电化学发光体系对制备出的禽流感病毒H9免疫复合物进行检测。实验选择最适的包被抗体，检测抗体和封闭剂，优化Ru标抗体的最佳稀释度。结果表明，在生物素化的兔抗H9多抗作为亲和素化的磁微球的结合抗体，鼠抗H9单抗作为Ru（bpy）₃²⁺标记抗体，2%BSA作为封闭剂，1:50倍稀释的Ru-鼠抗H9单抗条件下，非特异性吸附最低。测定不同浓度的H9抗原，发现抗原浓度在3.125μg/ml 100μg/ml范围内与电化学发光强度呈较好的线性关系。实验还通过测定不同亚型的禽流感病毒、不同来源的毒株和鸡的棉拭子样品，结果初步表明此分析系统特异性好，准确性高。