论文部分内容阅读
Hantupeptin A是Tripathi,A等人从新加坡大韩都岛的海洋蓝细菌Lyngbya majuscula中分离得到环酯肽化合物,研究者借助质谱、一维和二维核磁确定了分子的整体结构并对其进行初步药理研究,Hantupeptin A对白血病MOLT-4以及乳腺癌MCF-7细胞具有显著的细胞毒性。在本文中,我们主要探讨海洋环酯肽Hantupeptin A合成和其对人肺癌H1299细胞的活性。通过观察Hantupeptin A的结构特征,运用反合成方法,将Hantupeptin A分解成两个片段:P1片段和P2片段,通过对各片段合成来完成Hantupeptin A合成。由于P2片段中的3-羟基-2-甲基-7-辛炔酸（Hmoya）的构型已被Tripathi,A等人证实为（2R,3S）,但有部分文献报道中的3-羟基-2-甲基-7-辛炔酸构型为（2S,3R）,为了进一步确定Hmoya的构型,我们还合成构型为（2S,3R）的Hmoya片段,最终完成了Hantupeptin A和Hantupeptin A’两化合物的合成。为其初步抗肿瘤活性研究,还主要进行MTT、HE染色、流式细胞仪检测细胞凋亡等实验来确定其抗肿瘤活性。实验结果如下:1、化学合成部分结果:P1片段的合成:以L-苯基乳酸为原料,经酯基保护、与Boc-甲基化异亮氨酸缩合,脱Boc保护、与Boc-缬氨酸缩合等四步拿到P1片段,产率为40.9%。P2和P2’片段的合成:以Boc-甲基缬氨酸为原料,经酯基保护、与Boc-脯氨酸缩合、脱酯基保护、与（2R,3S）Hmoya或（2S,3R）Hmoya缩合等四步合成P2或P2’片段,产率分别为38.7%和38.5%（以Boc保护甲基化缬氨酸来计算）。Hantupeptin A和Hantupeptin A’合成:P1片段脱去酯基保护,与脱去Boc保护P2片段或P2’片段进行缩合,再脱酯基保护、脱Boc保护、在常见肽偶联条件（HATU/HOAt/DIPEA）下缩合等六步反应最终合成Hantupeptin A和Hantupeptin A’。合成Hantupeptin A和Hantupeptin A’总产率分别为2.7%和3.4%（以Boc保护甲基化缬氨酸来计算）。2、药理活性部分结果:MTT实验结果显示Hantupeptin A和Hantupeptin A’对H1299细胞生长具有一定抑制作用;不同浓度Hantupeptin A和Hantupeptin A’作用细胞后24h,倒置显微镜观察细胞,细胞间隙变大,细胞变圆,数量减少;HE染色实验结果显示细胞形态发生改变,胞质内出现空泡,染色质凝聚等;流式细胞仪检测细胞凋亡实验结果显示Hantupeptin A和Hantupeptin A’作用细胞可以诱导细胞凋亡。研究结论:1、本研究最终以九步合成海洋环酯肽Hantupeptin A和Hantupeptin A’,总产率分别为2.7%和3.4%（以Boc保护甲基化缬氨酸来计算）。2、Hantupeptin A和Hantupeptin A’对人肺癌H1299细胞能抑制细胞生长且可以诱导细胞凋亡。