精氨酸自组装成肽反应及色氨酸寡肽与DNA的相互作用研究

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寡肽类化合物一般具有较强的生物活性,多数可作为药物或药物前体,因此成为人们的研究热点之一。在无机磷试剂辅助下,α-氨基酸可以自组装,形成一系列寡肽,这为寡肽的合成提供一种新的思路。 本文以电喷雾质谱为主要分析手段,研究了磷试剂,反应温度,时间和溶剂对L-精氨酸成肽反应的影响,结果表明:(1)精氨酸在三氯氧磷辅助下能够自组装成肽,在三氯化磷和五氯化磷均不能成肽;(2)随着反应温度的升高,成肽速率变化不大;(3)精氨酸形成的肽链比较短,最长为四肽,延长反应时间也未观察到肽链的增长;(4)精氨酸在乙腈中成肽相对较好,在四氢呋喃中几乎没有肽的生成,而在1,4二氧六环中也未观察到肽的存在。利用ESI-MS研究了精氨酸二肽的正离子的多级质谱裂解规律:精氨酸二肽先失去一分子水,再失去氨基等小分子;或者直接失去一分子精氨酸,这是多肽b型断裂的典型特征。 利用反相高效液相色谱,以甲醇和水作为流动相,对色氨酸寡肽混合物进行了分离纯化。研究了流动相,进样量和流速对分离的影响并优化了色谱条件,制备得到了色氨酸二肽和环二肽产品,并用电喷雾质谱、红外光谱对色氨酸环二肽的结构进行了表征。 用紫外可见分光光度计法,研究了色氨酸二肽与小牛胸腺DNA的相互作用,考察了各种因素对相互作用的影响。结果发现,色氨酸二肽与小牛胸腺DNA混和后DNA吸光度降低。DNA-Trp-Trp体系随温度变化呈减色效应。固定反应浓度,随着反应时间延长,体系吸收值降低,直至平衡。逐渐增加二肽的浓度,体系的紫外吸收下降,达到一定浓度后不再变化。随着酸度值增加,体系呈增色效应。加入不同浓度的离子和磷酸根,影响二肽与DNA的相互作用。紫外可见光谱表明色氨酸二肽与DNA之间存在静电作用。
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