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哲罗鱼生长速度快，肉质鲜美，属珍稀冷水性鱼类，具有较高的经济价值。随哲罗鱼人工养殖规模的不断扩大，苗种的需求量不断增加，高质量仔稚鱼的大量产出是苗种培育的关键，苗种死亡率高成为制约哲罗鱼人工养殖发展的因素之一。因此迫切需要对哲罗鱼早期阶段的免疫能力和生殖发育进行研究。因此，本实验研究了哲罗鱼早期发育阶段的免疫酶活性和抗氧化物含量，睾酮和雌二醇的含量变化，仔稚鱼期性腺发育情况，并对哲罗鱼vasa基因进行克隆和表达分析，结果如下：1在哲罗鱼早期发育阶段，通过测定不同发育时期碱性磷酸酶(AKP)，酸性磷酸酶(ACP)，超氧化物歧化酶(SOD)，过氧化氢酶(CAT)活力和还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）的含量，研究鱼体内免疫酶活性变化和抗氧化物含量变化，发现哲罗鱼胚胎期ACP活性明显低于成鱼期［1］，说明在胚胎期ACP未发挥重要作用；但在破膜时，ACP活性显著升高，推测ACP在哲罗鱼出膜期发挥重要作用。在随后的仔稚幼鱼发育期，ACP活性一直维持在较高水平，保护鱼体。而AKP活性显著低于ACP。在胚胎期，AKP活性低且有所下降，只在破膜后至破膜后30d短暂升高后再次下降，表明在胚胎期AKP发挥的作用很小，只在出膜期短暂提高，这可能导致鱼体消化吸收能力较弱，对氨基酸等大分子物质吸收较困难，推测这可能是导致哲罗鱼早期苗种生长速度较缓慢的原因之一[2]。在胚胎至仔稚幼鱼期，SOD活性无明显变化，一直保持在1.46-1.77U之间，表明在哲罗鱼早期发育阶段，SOD并没有起到主要抗氧化作用。同样，CAT活性也极低，几乎可以忽略不计，表明在哲罗鱼早期发育阶段，CAT也几乎不发挥抗氧化作用。而在哲罗鱼出膜期，GSH含量显著增加，达到最大值3.7μmol/gprot，表明在破膜时，GSH发挥重要的抗氧化作用，促进鱼体发育。在仔鱼发育期，GSH含量虽然低于出膜期的含量，但仍保持较高水平，表明GSH在哲罗鱼破膜后至仔稚幼鱼阶段一直起到重要的抗氧化作用，保护鱼体。在胚胎期间，MDA的值都在0.1nmol/mgprot上下浮动，含量很低，表明这期间，哲罗鱼的过氧化程度很低。但在出膜期和随后的仔稚幼鱼发育阶段，MDA含量持续增加，表明破膜后，哲罗鱼的脂质过氧化程度明显升高。2在哲罗鱼早期发育阶段，哲罗鱼体内的雌二醇（E2）含量波动很大。从胚胎初期至破膜前，E2含量持续升高至峰值，在出膜期，E2含量下降至较低水平。之后，在仔稚鱼期，E2含量又开始回升，直至到幼鱼期，E2含量又开始降低，且显著低于胚胎期和仔稚鱼期的含量。而睾酮（T）含量，在胚胎期，持续上升至最高点，直至出膜期时，显著下降直至最低点，到了仔稚幼鱼期，T含量略有回升并保持平稳趋势。这表明E2和T在胚胎期的含量都比在仔稚幼鱼期高，在出膜期，E2和T含量都显著下降，而T含量在出膜期就已降至低水平，而后仅略有回升并保持平稳，E2则是在仔鱼发育期显著回升至高峰，直至幼鱼期才再次下降至低水平。在仔鱼期，哲罗鱼的性腺沿鳔发育，由系膜悬系，原始性腺基本形成。可观察到PGCs由肾区向原始性腺迁移。稚鱼期可观察到性腺处于肾管下方，分列在鳔的两侧，由系膜相连。呈叶状。3对vasa基因克隆，测序结果表明,哲罗鱼vasa基因全长2711bp（GenBank ID：KF554113），开放阅读框（ORF）长1974bp,编码658个氨基酸。氨基酸序列含有DEAD蛋白家族所有的9个保守结构域：xYxxPTPVQ，AQTGSGKTA，PTRELINQ，TPGR，DEAD，SAT， RGLD，HRIGRTGR以及GG重复序列[3]。与GenBank核酸数据库中已知的其他物种的vasa基因序列相比，发现哲罗鱼vasa基因与大西洋鲑的vasa基因相似性最高。与大西洋鲑，虹鳟，白点鲑的vasa相似度分别为93%，92%，91%。这表明，vasa基因序列在鲑科鱼中是相当保守的。通过半定量和实时荧光定量得到的组织分布可知，在哲罗鱼胚胎发育阶段，vasa基因持续表达，在Ⅰ龄和Ⅱ龄哲罗鱼中，vasa基因仅在精巢和卵巢中表达，卵巢中的表达量高于精巢，Ⅰ龄中的表达量高于Ⅱ龄。表明vasa mRNA是母源性的，且仅在生殖细胞中特异表达，可作为分子标记追踪原始生殖细胞（PGCs）的形成，迁移，分化，有助于了解性腺分化机制。