论文部分内容阅读
在如今经济和社会环境等因素影响下,人们生活方式也因而转变,心血管疾病（Cardiovascular Disease,CAD）不仅作为我国各省份地区死亡的主要原因受到社会及国民关注,也因其作为全球健康热点问题倍受世界各国人民关注[1]。而尤以急性冠脉综合征（acute coronarysyndrome,ACS）为著,因其临床上存在较高死亡风险。现今,支架植入治疗（Percutancous coronary Interventio,PCI）成为冠心病治疗最佳方案,愿意行PCI术患者慢慢增加,药物洗脱支架（Drug-eluting stent,DES）与抗凝药物更新使支架内再狭窄（In-stent Restenosis,ISR）出现概率减少为约10%[2,3]。而糖尿病患者PCI术后ISR发生率为非糖尿病4倍左右,且大多数患者预后情况较差[4,5]。冠心病与2型糖尿病已被临床证实都属于慢性炎症性疾病,存在代谢紊乱与免疫异常等病理基础,而这种持续慢性的炎症也被认为与ISR发生密切相关[6]。有研究表明,炎症小体作为天然免疫系统的组成部分之一,在炎症反应中发挥核心作用,且其已被证实参与2型糖尿病合并冠心病疾病发展过程。NLRP3炎症小体和先天免疫反应发生密切相关,可以启动及激活炎症反应信号[7]。因此,本文将分析NLRP3炎症小体与ACS合并T2DM患者PCI术后再狭窄发生的关系。目的:本课题将比较不同病例组患者血浆中IL-1β、IL-18的含量,以及比较外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）中NLRP3 mRNA转录及蛋白表达水平,明确IL-1β、IL-18及NLRP3炎症小体与ACS合并T2DM患者PCI术后再狭窄发生的相关性,并分别分析血浆IL-1β、IL-18与NLRP3 mRNA转录及蛋白表达水平之间的相关性,以初步探讨NLRP3炎症小体在ACS合并T2DM患者PCI术后再狭窄发生过程中的作用。方法:1.病例采集及分组:选取曾诊断急性冠脉综合征并行药物洗脱支架植入术,于2018年10月2019年12月在延大附院心内科复查冠脉造影（CAG）及冠脉CTA的ACS合并T2DM患者134例,根据复查结果,分别纳入再狭窄组（ISR组）（52例）、非再狭窄组（NISR组）（82例）。2.收集所有入组患者的性别、年龄等一般资料,GLU、TG、TC等临床生化资料及EF值、支架直径、支架长度、Gensini评分等影像及手术资料。3.用EDTA抗凝管收集入组患者肘正中静脉血5ml（晨起空腹）,并分离所有患者血清及外周血单个核细胞（PBMCs）,存于-80℃低温冰箱。4.用RT-q PCR法测两组患者PBMCs中NLRP3 mRNA转录水平。5.用Western blot法测两组患者PBMCs中NLRP3蛋白表达水平。6.用ELISA法测两组患者血浆IL-1β、IL-18含量。7.对两组患者上述所有指标行统计学分析,以明确NLRP3炎症小体在T2DM合并ACS组PCI术后再狭窄过程中的相关作用。结果:1.两组患者一般临床资料比较均无统计学意义（P>0.05）。2.临床生化及影像资料结果:两组患者各指标比较差异均无统计学意义（P>0.05）。3.临床手术资料结果:两组患者比较在支架直径及Gensini评分两项指标方面（P<0.05）,差异有统计学意义;除外这两项其余指标比较差异无统计学意义（P>0.05）。4.ELISA检测结果:1)IL-1β在ISR组患者血浆中的含量为:（25.74±3.30）ng/L,对比其在NISR组血浆中的含量为:（19.08±3.68）ng/L,差异有统计学意义（P<0.05）。2)IL-18在ISR组患者血浆中的含量为:（129.00±19.78）ng/L,对比其在NISR组血浆中的含量:（105.82±12.74）ng/L,差异有统计学意义（P<0.05）。5.两组患者NLRP3蛋白及mRNA水平比较ISR组患者外周血PBMCs中NLRP3 mRNA表达水平较NISR组明显增高,差异有统计学意义（P=0.000）,ISR组患者外周血PBMCs中NLRP3蛋白表达水平均较NISR组明显增高,差异有统计学意义（P=0.000）。6.ISR发生的多因素Logistic回归分析结果以是否出现再狭窄ISR（是=1,否=0）为因变量,以支架直径、Gensini评分、IL-1β、IL-18、NLRP3蛋白、NLRP3mRNA为协变量,多因素Logistic回归分析示支架直径、IL-1β及IL-18、NLRP3蛋白及NLRP3 mRNA是发生ISR的独立危险因素（P<0.05）,差异有统计学意义。7.IL-1β和IL-18对ISR发生的ROC曲线分析结果示IL-1β和IL-18曲线下面积AUC分别为0.906、0.843,敏感度分别为76.9%、76.9%,特异度分别为90.2%、91.5%;提示IL-1β和IL-18对ACS合并T2DM患者ISR发生存在较好的预测意义。8.相关性分析:1)血浆IL-1β:在ISR组中该因子与外周血单个核细胞中NLRP3蛋白（r=0.361,p=0.009）及NLRP3 mRNA（r=0.306,p=0.027）均呈正相关。在NISR组中该因子与外周血单个核细胞中NLRP3蛋白（r=0.235,p=0.034）及NLRP3 mRNA（r=0.298,p=0.007）均呈正相关。2)血浆IL-18:在ISR组中该因子与外周血单个核细胞中NLRP3蛋白（r=0.274,p=0.049）及NLRP3 mRNA（r=0.389,p=0.004）均呈正相关。在NISR组中该因子与外周血单个核细胞中NLRP3蛋白（r=0.382,p=0.000）及NLRP3 mRNA（r=0.224,p=0.043）均呈正相关。结论:1)IL-1β、IL-18参与ACS合并T2DM患者PCI术后再狭窄的发生,且IL-1β、IL-18对再狭窄发生有较高预测价值。2)NLRP3炎症小体参与ACS合并T2DM患者PCI术后再狭窄的发生,且NLRP3炎症小体可能是通过炎症因子IL-1β、IL-18发挥促炎作用。