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目的:探讨水通道蛋白-4(AQP4)和水通道蛋白-9(AQP9)在严重烧伤后脑水肿过程中的表达规律,以阐明烧伤后脑水肿的发生机制。 方法:健康成年Wistar大鼠90只,体重250-300g,随机分成两组:即对照组15只和致伤组75只(30%体表面积Ⅲ度烧伤)。致伤组在伤后2h、6h、12h、24h及48h各时间点再分成5小组。每小组各取5只分别用于脑含水量的测定,HE染色进行病理观察,免疫组化检测AQP4、AQP9的表达,原位杂交实验检测AQP4mRNA和AQP9mRNA的表达。实验结果采用图像分析技术分析脑组织AQP4和AQP9及其mRNA的表达水平。 结果:严重烧伤后脑含水量显著增加:烧伤后2h脑含水量开始增加,伤后6h达高峰,48h内仍高于正常水平。HE染色可见其脑细胞有水肿样改变,神经细胞和神经胶质细胞周围间隙以及血管周围间隙增增宽,神经胶质细胞增生,个别神经元出现核浓缩现象。免疫组化结果显示AQP4和AQP9阳性物质在脉络丛、SFO、室管膜、海马、视上核和室旁核等处表达,表现为胞膜着色,胞浆和胞核不着色,烧伤后各时间段其表达较对照组均有显著增加,在伤后6h达高峰。原位杂交显色在胞膜和胞浆,而胞核不显色,其阳性物质分布部位以及出现高峰的时间点与免疫组化结果一致。在整个脑水肿形成过程中,AQP4、AQP9分别与其mRNA的表达呈显著正相关;而且 重庆医科大学硕十学位论文AQP4、AQPg的表达分别与脑含水量的变化也呈高度正相关。 结论:严重烧伤后脑含水量不同程度增加,HE染色显示脑组织有水肿样改变,说明烧伤后有脑水肿出现,其高峰时间在烧伤后6h。免疫组化和原位杂交结果均显示AQP4、AQPg及其mRNA在烧伤后表达增强,其高峰出现时间与脑含水量的高峰时间一致。据上述结果我们推测AQP4、AQPg参与了严重烧伤后脑水肿的形成,在烧伤后脑水肿发生发展过程中起着非常重要的作用。