岗梅中酚酸类成分分离纯化鉴定研究

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目的:现今对岗梅研究主要在于皂苷类化合物,有文献报道岗梅中还含有酚酸类成分,但未对其进行深入研究,故本论文以岗梅总酚酸为研究对象,建立岗梅中总酚酸的含量测定方法,并测定了 20批岗梅药材。以岗梅总酚酸提取率为指标,利用响应曲面法优化岗梅总酚酸提取工艺,应用大孔吸附树脂纯化岗梅总酚酸。最后对岗梅酚酸类成分进行分离鉴定。方法:1岗梅中总酚酸提取工艺研究1.1采用70%乙醇回流提取岗梅中总酚酸,利用紫外可见分光光度计,在312nm波长下测定总酚酸的吸光度。1.2以岗梅总酚酸提取率为指标,在单因素实验的基础上,利用响应曲面法对乙醇浓度、提取时间及溶剂用量三个影响因素进行优化。2岗梅中总酚酸的大孔吸附树脂纯化工艺研究以岗梅总酚酸的含量为考察指标,比较不同型号树脂对岗梅总酚酸的分离纯化能力。并通过考察洗脱溶剂、洗脱溶剂用量及洗脱流速,建立大孔吸附树脂纯化岗梅总酚酸的工艺条件。3岗梅中酚酸类成分分离鉴定采用凝胶色谱、反相硅胶色谱、高效液相色谱、高效制备液相色谱等色谱技术建立岗梅酚酸类化合物的分离方法,并运用现代波谱学的方法对化合物进行结构鉴定。结果:1岗梅中总酚酸提取工艺研究1.1酚酸在2.12~10.6 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9995);加样回收率为100.7%,RSD为2.08%。所测定的20批岗梅根中总酚酸的含量在0.1%~0.3%范围之间。1.2应用响应曲面法对不同因素进行优化,确定最佳提取工艺为:乙醇浓度为54%;提取时间为88min;溶剂用量为33mL。而对乙醇浓度、提取时间及溶剂用量三个因素进行比较得出对岗梅总酚酸提取率的影响顺序依次为:乙醇浓度(A)>溶剂用量(C)>提取时间(B)。2岗梅中总酚酸的大孔吸附树脂纯化工艺研究X-5型大孔吸附树脂具有较好的吸附和解吸附性能,其对岗梅中总酚酸最佳纯化工艺条件为上样液质量浓度为1.57mg/mL,上样体积为40mL,洗脱溶剂为40%乙醇,用量为2倍柱体积,洗脱流速为2.0mL/min,经大孔吸附树脂纯化后酚酸含量为6.31%,其精制度为445.6%,RSD为0.6%。3岗梅中酚酸类成分分离鉴定从岗梅根中分离鉴定了 5个酚酸类化合物,分别为咖啡酸、咖啡酸甲酯、绿原酸、隐绿原酸及3,5-0-二咖啡酰奎宁酸甲酯。其中咖啡酸已报道过,其余4个化合物为首次从该属植物中分离得到。结论:1岗梅中总酚酸提取工艺研究1.1所建立的紫外可见分光光度法简便、灵敏、准确可靠,可用于岗梅总酚酸的含量测定。1.2利用响应曲面法考察了多因素间的交互作用,减少试验次数,优化了提取工艺条件,能有效地减少实验的盲目性,为岗梅的进一步利用开发提供理论依据。2岗梅中总酚酸的大孔吸附树脂纯化工艺研究X-5型大孔吸附树脂富集和纯化岗梅总酚酸的容量大、效果好,且工艺简便,生产连续化程度高,适宜于岗梅总酚酸的分离纯化。3岗梅中酚酸类成分分离鉴定分离鉴定所得酚酸类单体不仅丰富了岗梅根化学成分研究,亦可为岗梅根制定质量标准提供物质基础。
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