核酸适配体纳米粒柔性支架及其循环肿瘤细胞的高效捕获

来源 :苏州大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:opentv2007
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本文以阴离子聚电解质聚丙烯酸(PAA)为交联剂,在玻璃基片上构建了三层Si02纳米粒的粗糙表面,再化学连接PAA,获得了三层纳米粒柔性支架(FTLS)。在FTLS的PAA上化学接连TD05适体,成功组装了多重适体修饰的柔性支架(Apt-FTLS)。利用扫描电子显微镜和原子力显微镜表征了该支架的形貌特征,结果表明支架具有三层纳米粒的层状结构。对于特异性捕获效率,Apt-FTLS是单层纳米粒刚性支架的17倍;而支架自身的非特异性吸附,仅仅为单层纳米粒刚性支架的11.1%。因此,本文实现了简单、快速、可控的纳米粒有序多层纳米粒柔性支架的组装,本文制备的支架既具有纳米粒结构,又同时具有柔性结构,使得支架具有高粗糙度的优势。基于上述分析,本文构建了PAA多适体修饰的柔性支架交联纳米结构层,即多适体纳米粒柔性支架,其中包括多个适配体修饰聚合物PAA和三层纳米颗粒结构。支架组装如下:首先,有活化的羧基基团的大分子量的PAA分子通过PAA交联三层纳米粒子结构被化学连接在粗糙载体基板上,然后许多氨基修饰的寡核苷酸适体同时连接在一种多羧基聚合物PAA分子上。多价核酸适配体柔性支架有两个方面的结构优势和相应的捕获细胞的优势。首先,由于三层纳米结构,支架组装的载体表面具有较高的粗糙度。当粗糙度明显增大时,间隔区长度(即多适体和载体之间的支架的高度)会大大增加了,然后由于载体基板的空间位阻,使其对于捕获多个核酸适配体的流动靶细胞的能力明显下降。其次,三层纳米颗粒的支架和PAA具有柔性结构。由于这类柔性支架有一定程度的弯曲的能力,多配体修饰的支架应该更容易弯曲,包裹形成一个合适的三维立体结构,为了更好的与同一细胞的多个受体的相互作用,更容易形成良好的多价结合,流动靶细胞的支架的捕获力大大增加。本文实现了简单、快速、可控的纳米粒有序多层柔性支架组装,该支架同时具有纳米粒结构,又具有柔性结构,并且表现出了高粗糙度的优势。对于目标细胞,本文中的支架表现出了极低的非特异性吸附,修饰了多价适体的支架具有极高特异性捕获效率。
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